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本发明公开了一种用于药物筛选的受体色谱载体的制备方法,将SpyCatcher纯化蛋白偶联至载体介质上作为通用载体,在受体蛋白序列中添加SpyTag标签并重组表达,利用SpyTag/SpyCatcher自连系统的固定化方式,通过共同孵育将带SpyTag标签受体蛋白的细胞裂解液中以捕获方式结合并定向固定到载体上,实现受体色谱载体的快速制备。该方法避免了针对不同受体蛋白的纯化过程,可适用于不同受体蛋白对应的色谱载体制备,并且受体定向固定、结合牢固、在生理条件下结合固定故能保持受体最佳活性,因而具有便捷性、通用性和实用性。