[00103142]巯基化石墨烯酸性磷酸酯酶传感器的构建方法

　　由齐鲁医药学院教师高先娟、张平平、张玉军、学生王保玉、教师李霞自主研发成果《基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器的构建方法》（专利号：ZL 201711399495.X）成功获得国家发明专利，该成果于 2017 年 12 月申报，2020 年 5 月获得专利证书。该发明属于生物传感器技术领域，该方法以自组装金电极为载体，在其表面负载羧基化氧化石墨烯、酸性磷酸酯酶，得到基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器。石墨烯的负载增大了电信号，本发明利用自组装技术和静电吸附减小酶的失活，使得酸性磷酸酯酶生物传感器的稳定性与重现性好，增加了酸性磷酸酯酶生物传感器的寿命。

　　酸性磷酸酶生物传感器 酸性磷酸酯酶(Acid Phosphates，简称ACP，E.C.3.1.3.2)是一种水解酶，它能催化磷酸单酯水解，是生物磷代谢的重要酶类，临床上 ACP 可以作为检出细胞中溶酶体的一种标志酶，将血清中 ACP 水平作为诊断前列腺癌、骨骼疾病、血小板破坏过多、肺栓塞等疾病的重要指标。ACP 主要来自前列腺，精子中ACP 的活力水平，常用作判断精子活力的标准之一。测定血清酸性磷酸酯酶是一种有助于诊断前列腺癌的方法。授权专利《基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器的构建方法》属于生物传感器技术领域，具体涉及一种基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯

　　酶生物传感器的构建方法：将金电极通过自组装 L-半胱氨酸得到自组装金电极，经 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺溶液初次活化后，再在其表面负载羧基化氧化石墨烯，经1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺溶液再次活化后，最后修饰酸性磷酸酯酶，得到基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器，该传感器的稳定性与重现性好，寿命长，利用该传感器可用于酸性磷酸酯酶的动力学测定，测定其米氏常数和最大反应速率，通过该生物传感器可检测精子活力。该酸性磷酸酯酶生物传感器可以对血清中酸性磷酸酶浓度进行检测，为临床上诊断前列腺癌提供数据参考。