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本发明涉及一种检测p52Shc/p66Shc基因表达模式的分子诊断试剂盒及其检测方法及应用,试剂盒由RNA抽提体系、RNA逆转录反应体系、PCR反应体系组成,其中所述PCR反应体系含有特异扩增p52Shc基因的引物序列为:序列1和序列2;含有特异扩增p66Shc基因的引物序列为:序列3和序列4。本发明的试剂盒对实体肿瘤患者的临床术后标本进行分析,根据其p52Shc/p66Shc基因表达模式,可判断患者的病理分型和预后。本试剂盒具有判断准确性好、灵敏度高、使用成本低和适用范围广等优点。