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本项目的关键技术在于桔小实蝇免疫球孢白僵菌Bb-swu12的关键基因筛选、特异表达害虫基因dsRNA的球孢白僵菌的工程改造、天敌及传粉昆虫安全性评估。 (1)本项目通过对球孢白僵菌Bb-swu12感染的桔小实蝇进行转录组测序,分析并筛选至关重要的免疫靶标基因。
后续采用RNA干扰技术验证该基因在桔小实蝇免疫球孢白僵菌Bb-swu12侵染的关键作用。 (2)本项目通过同源重组技术将(1)的关键免疫基因dsRNA区域的正向序列和反向序列插入至真菌双表达载体pRCy1中,以形成“发卡结构“供真菌产生特异性dsRNA,获得项目产品球孢白僵菌Bb-swu12plus, (3)模拟田间防控模式,引物天敌寄生蜂、传粉良虫西方璀蜂,评估项目产品Bb-swu12plus对寄生蜂和蜜蜂的安全性