[00107898]TrkA 基因作为绵羊产羔数性状的分子标记及其应用

技术领域

本发明属于绵羊分子标记筛选技术领域，具体涉及 TrkA 基因作为绵羊产羔 性状的分子标记及其应用。本发明的分子标记克隆自绵羊 TrkA 基因。

背景技术

传统育种方法中，对家畜性状选择的方法多依赖于家畜的表型，这种方法在 大家畜选育中需要丰富的经验和长达几十年时间。对于一些由微效多基因控制的 低遗传力的数量性状，例如绵羊产羔性状，不仅由母羊自身遗传因素决定，且受 到不同环境和饲养条件的影响，常规育种方法遗传改良进展缓慢。形态学标记、 细胞学标记、生物化学标记以及免疫学标记虽然已经在优良种畜选育中进行应 用，但由于这些标记的多态性低和信息量小，且是对基因的间接反映，受到基因 与环境互作的影响比较大，在生产实践中有很大的局限性。随着分子生物学技术 的发展，尤其是分子遗传标记技术的发展和完善，利用与目标性状紧密连锁的分 子遗传标记，对目标性状进行跟踪性选择，减少育种过程中选择的盲目性，并可 以进行早期选育，极大提高育种效率。

TrkA(Tyrosine Kinase A)是由原癌基因 trk 编码的酪氨酸蛋白激酶受体，神经生 长因子(NGF)以二聚体的形式与其相结合，诱导 TrkA 酪氨酸残基处磷酸化，通过 激活磷脂酶 Cγ(PLCγ)→磷脂酶肌醇激酶(PI3K)→衔接蛋白(Shc)信号通路将胞外 信号传递到细胞核(马永和，2010)。TrkA 不仅介导 NGF 对神经系统中胆碱能神经 元的分化和发育的调控(CountsS 等，2005)，而且在生殖系统也发挥功能，已经发 现在人、鼠、金仓鼠、绵羊和山羊等动物卵泡均有 TrkA 基因表达(马永和等，2010)。 不同发育阶段卵泡中 TrkA 表达丰度不同，猪的原始卵泡和初级卵泡的卵泡细胞 和卵母细胞不表达 TrkA，但在二级卵泡和三级卵泡的卵泡细胞及卵母细胞中有大 量表达(Levanti MB 等，2005)。NGF 与 TrkA 参与早期卵泡的装配、颗粒细胞的增 殖、卵母细胞的成熟及排卵等过程(Dissen GA 等，2001)。在体外，NGF 还可以促 进牛腔前卵泡的发育(李海等，2005)和猪卵母细胞成熟(陆晨等，2013)。NGF-TrkA 复合物对输卵管和子宫发育亦发挥重要作用，TrkA 在子宫内膜细胞、腺细胞、基 质细胞、输卵管黏膜上皮细胞均有表达，且卵泡期，输卵管中表达量显著高于卵 巢(马永和等，2010)。

现有文献表明，TrkA 基因参与了动物繁殖调控过程，尤其是卵子发生和卵泡 发育。因此，寻找该基因中变异位点，通过与产羔性状间的关联分析，是进行分 子遗传标记辅助选择的基础。此发明开展了绵羊 TrkA 基因部分基因组序列克隆和 SNP 筛查、检测及与产羔数性状关联分析，以提高繁殖力母羊选择的准确性， 可望绵羊加快育种进程。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，特别是现有绵羊育种周期长、选择 准确性低、无法进行早期选育等技术缺陷，提供一种提高绵羊产羔数性状关联的 分子标记作为辅助选择的手段。本发明的核心在于通过 PCR-RFLP 技术对候选个 体的 TrkA 基因部分序列进行基因型分析，为绵羊产羔数性状检测提供一种辅助 选择的遗传标记。