[00112110]一种鱼红细胞氧化应激模型的建立方法
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技术详细介绍
本发明公开了一种鱼红细胞氧化应激模型建立方法,将鲤鱼尾部消毒,从每尾鱼尾部抽取约1毫升血液。将血液放入6毫升含肝素钠的鲤鱼生理盐水中,血样在900g,4℃下离心10分钟,弃去上清液。红细胞沉淀悬浮在6毫升鲤鱼生理盐水中,然后在900g,4℃下离心10分钟。用鲤鱼生理盐水重新悬浮红细胞沉淀,洗涤2次后,细胞沉淀悬浮在6毫升鲤鱼生理盐水中,4℃保存备用。取适量的红细胞悬液,加入等体积的Fe2+/H2O2混合溶液,其终浓度为40μM/20μM,37℃孵育8-10小时。样品在1000g,4℃条件下离心3分钟,细胞样用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定凋亡情况。本发明首次使用Fe2+/H2O2混合溶液为自由基·OH的来源,建立红细胞氧化应激模型。
