[00112192]基于ATP-TCA技术膀胱癌个体化灌注化疗药物筛选平台建设及临床推广

①课题来源与背景：膀胱肿瘤是泌尿系肿瘤中最为常见的一种疾病。大约有超过70%的患者在初次确诊膀胱肿瘤时,其病理类型为非肌层浸润性膀胱肿瘤（NMIBC）。对于NMIBC患者来说,首选的治疗方法是经尿道膀胱肿瘤等离子切除术（TUR-BT）。然而,在术后有70%左右的患者可能会出现肿瘤复发的情况,并且需要术后的长期维持治疗。研究表明,相对于经验灌注化疗来说,依据药物敏感性实验指导的个体化灌注化疗的复发率明显低于经验灌注治疗组。这使得非肌层浸润性膀胱肿瘤术后个体化膀胱灌注化疗成为必然的选择。 ②技术原理及性能指标：肿瘤药物敏感性实验是个体化化疗的理论基础和依据之一。在治疗前或治疗过程中进行肿瘤药敏实验,对于选择与优化药物组合与治疗方案以提高疗效、减轻药物引起的不良反应和MDR的发生有着十分重要的意义。三磷酸腺苷生物荧光肿瘤细胞体外化疗药物敏感性检测（ATP-TCA）,其主要实验原理如下：活体细胞最基本的能量来源于细胞内的ATP。当细胞病理性死亡或程序性凋亡时,细胞中所含的ATP快速水解并释放能量,通过测定的细胞内源性ATP含量的多少即可大致反映细胞活性的高低和活细胞的数量。荧光酶在有氧条件下与荧光素迅速结合,催化细胞内的ATP转变成AMP,并释放出波长为562nm的荧光,此时依靠设备测定所产生的荧光强度的高低,即可推测活细胞的数量多少及活性度的高低。肿瘤细胞在经过化疗药物培养后,根据设计好的计算方法,即可推测出不同化疗药物各梯度浓度下的肿瘤细胞生长抑制率,依据相应判断指标,评估肿瘤细胞对各种化疗药物敏感性,从而选择出最佳的治疗方案。 ③技术的创造性与先进性：ATP-TCA检测技术是一种先进的肿瘤体外药物敏感性检测技术,在临床肿瘤治疗研究和药物筛选研发等方面已在国内外广泛启用。由于膀胱灌注化疗属于局部给药,不需要经过体内的代谢和运输就可以直接接触肿瘤细胞。与静脉药物化疗相比,膀胱肿瘤体外药敏实验能够更真实的模拟药物在人体内的发挥作用的过程。许多的国内外研究者证实通过肿瘤体外药敏试验来指导膀胱癌术后灌注化疗,均取得不错的疗效。本研究中,药敏组与经验灌注化疗组在肿瘤复发率上具有显著差异,说明通过ATP-TCA技术选取的最敏感药物进行非肌层膀胱肿瘤术后个体化的灌注化疗,能够显著的降低膀胱肿瘤术后的复发率,ATP-TCA能够为临床治疗非肌层膀胱肿瘤提供指导意义。安徽省内关于肿瘤体外药物敏感性检测方面研究较少,尚未开展相关的临床研究,更没有涉及针对临床提供的肿瘤药敏检测技术。经过该临床研究帮助建立ATP-TCA技术膀胱癌个体化灌注化疗药物筛选实验室质量管理体系及临床操作规范,验证该项技术的临床价值,以便于推广。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性： 肿瘤体外药敏实验发展至今已有50多年历史,其中ATP-TCA检测技术起源于20世纪70年代中期。已在临床肿瘤治疗研究和药物筛选研发等方面已在国内外广泛启用,并在卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌等肿瘤静脉化疗药物的筛选中已经显示出较好的疗效。该项目适用于非肌层浸润性膀胱癌患者术后维持灌注化疗的药物筛选。该项目安全性具有良好的保障：①因采用患者的离体组织进行培养,对患者无任何不良影响;②生物安全柜是负压过滤系统,可以防止造作人员吸入有细胞毒的化疗药物;③所有废物按医疗垃圾的处理程序进行无害化处理。④所有患者ATP-TCA检测结果及相关诊疗信息均严格保密,签署知情同意。患者所有信息的获取,包括患者的各项检查指标等仅用于患者疾病治疗和医学研究的需要。⑤所选用化疗方案均为指南推荐药物,不违反诊疗规范。 ⑤应用情况及存在的问题：肿瘤药敏检测为我院特有项目,目前为我省唯一开展该项目的医疗机构,为恶性肿瘤患者筛选有效的化疗药物及方案提供了参考。因ATP-TCA检测实验室建立及人员培训要求较高,我院建立成熟的实验方法及个体化的灌注化疗方案,为皖南地区乃至全省人民该疾病的个体化治疗提供平台。同时,为地区医保药品目录筛选提供依据,推动诊疗指南向个体化治疗发展。膀胱癌的发病逐年增加,精准医疗符合医学发展规律,市场广阔,该检测项目已纳入我省医保目录,可产生一定的经济利益,为国民经济发展服务。实验中对标本要求相对较高（肿瘤总体积≥1cm3,且术后病理提示为非肌层浸润性）,故达不到随机区组,统计结论受到影响,存在偏倚可能。从项目开展到术后随访时间尚短,患者远期肿瘤复发的情况需长期随访才能准确反映该技术的临床价值,故现阶段复发率统计临床价值有限,本课题受限于时间纳入患者仍需继续随访以取得有临床价值的结论。 ⑥历年获奖情况：基于以上研究,论文1篇已在线发表,2篇正在投稿;已引进膀胱肿瘤专业方向博士1人、硕士1人;培养正高1人;正申请实用新型专利1项,国家知识产权局已受理;并于省级学术会议交流、推广。