[00113622]人参抗菌肽的克隆、表达纯化和活性研究
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技术详细介绍
1)课题来源与背景：本课题来源为吉林省教育厅“十三五”科学技术研究规划项目,项目编号为JJKH20181265KJ。 2)技术原理与性能指标：本研究通过在人参转录组数据库中找到抗菌相关基因的同源物,获得了人参thionins蛋白的基因序列,使用生物学软件分析其重要位点和结构特点。使用分子克隆技术成功构建人参thionins原核表达质粒并使其在大肠杆菌宿主中重组表达。采用亲和纯化法获得大量重组人参thionins蛋白,使用纸片扩散法,半数抑制浓度实验和质膜通透性实验验证人参thionins蛋白的抑菌活性和抑菌机理。 3)技术的创造性与先进性：本研究首次使用大肠杆菌原核表达系统获得了人参thionins重组蛋白并验证了其显著的抗黑斑病真菌活性。 4)技术的成熟程度,适用范围和安全性：本项目技术成熟,蛋白表达量大,抑菌效果好。可应用于人参黑斑病害的防治。有希望开发成一种活性高,稳定性好且无污染的新型生物农药,以提高人参产量和质量。 5)应用情况及存在的问题：实验田应用。
