[00115442]南方根结线虫毒性相关基因的鉴定

根结线虫(Meloidogyne spp.)是农作物最重要的病原物类群之一，目前对于该类内寄生物与寄主植物互作的分子基础了解极少。本研究以根结线虫与寄主番茄抗性基因Mi的组合为对象，通过比较毒性和无毒群体间的mRNA 的差异探索其互作关系中线虫毒性相关基因的分离和分析。目前已取得如下研究进展和结果：（1）通过人工选择获得了南方、爪哇和花生根结线虫3种主要根结线虫针对Mi基因的毒性和无毒近等基因系；（2）研制了根结线虫侵入寄主后的寄生阶段的微量RNA提取和cDNA合成的方法，克服了以往研究只针对线虫非寄生阶段的技术局限性；（3）应用抑制差减杂交法分析了南方、爪哇和花生根结线虫的毒性和无毒群体间在侵入后阶段表达的基因的差异，应用点杂交和RT-PCR技术筛选得到无毒群体特异的基因2个，并测定了其全长cDNA序列。检索数据库表明该2个基因不同于已报道的任何基因；（4）对2个基因的特性进行了初步研究，发现2个基因的产物的5´端均含有分泌信号肽，其表达场所为食道腺，表明其很可能为真正的毒性相关基因。对相关基因的进一步特征分析将有助于揭示根结线虫毒性变异的分子机理，以及开劈新型的根结线虫防治途。