[00115509]多黏菌素B1的纯化制备研究

课题来源及背景：多黏菌素B为环脂肽类抗菌肽,对革兰氏阴性杆菌有强效杀菌作用,硫酸多黏菌素B是临床治疗多重耐药革兰阴性杆菌感染的“最后一道防线”。由于多黏菌素B为发酵产生的混合物,即含有多种结构类似的组分,主要有效组分为多黏菌素B1。目前,中国药典、欧洲药典、美国药典均未提供多黏菌素B相应组分的单一对照品,企业在对多黏菌素B的质量控制过程中,采用混合对照品进行组分测定,存在不能严格控制多黏菌素B质量的问题,故迫切需要多黏菌素B1单一对照品。上海市食品药品检验所抗生素室微生物室具有多年的多肽类药物研究经验,建立了多肽类药物结构分析及单一组分纯化制备平台,在多黏菌素、杆菌肽、达托霉素、缩宫素等多肽类药物的的质量控制及研究方面建立了国内领先的技术方法,可用于抗菌肽类质量控制。 研究目的及意义：本技术中建立适用于多黏菌素B1的纯化制备方法并提供相应的纯化后的多黏菌素B1对照品,以供企业开展相关的质量研究。本研究将促使企业以单一对照品来控制产品质量,期望获得改进生产工艺、提高产品质量的效果。 主要论点及论据：本技术建立了适用于多黏菌素B1的纯化制备方法,并提供纯化制备后的多黏菌素B1帮助企业提高质量控制水平。该技术方法应用Waters自动纯化系统纯化制备硫酸多黏菌素B中的多黏菌素B1组分,并经旋转蒸发仪去除溶剂、冻干机冻干得到多黏菌素B1的固体。采用中国药典2015年版硫酸多黏菌素B中多黏菌素B组分检查项下的HPLC方法测定制备的多黏菌素B1的纯度（面积归一化法）,纯度均大于96%。为企业提供了200mg以上的多黏菌素B1纯品。 创见与创新：（1）本方法采用自动纯化系统制备了200mg以上的多黏菌素B1的纯品,为企业提高质量标准、严格控制产品质量奠定了基础;（2）为大量制备其他类似的多黏菌素B组分提供了研究基础,可以推广至其他抗菌肽类组分的纯化制备;（3）为研究单一组分的抗菌活性及结构分析提供了物质基础。