[00115791]双链RNA分解酶基因的克隆及广谱抗病毒病辣椒的培育

辣椒上存在多种植物病毒病害，不仅导致产量下降而且严重降低辣椒的商品价值，造成严重的经济损失。寻找广谱抗植物病毒性病毒新途径是目前国际抗病毒转基因的热点之一。本项目拟从酵母中分离能够特异性分解双链RNA 的核酸分解酶基因，利用农杆菌介导法将该基因导入辣椒，培育转基因辣椒植株。用辣椒上发生的主要植物病害对获得转基因辣椒进行接种挑战，研究双链RNA 分解酶基因表达产物对辣椒的病毒性病害的防治效果，进一步开发利用我国丰富的广谱抗病毒基因资源、探索一条导入一种外源基因同时防治多种植物病毒性病害的抗病毒基因工程新途径。为进行广谱抗病毒转基因植物研究的创新提供科学依据，为辣椒病毒病的科学防治提供理论基础。本项目完成了pac 1 基因的原核表达并验证了对TMV-dsRNA，CMV-dsRNA 的体外降解活性，构建酵母pac 1 全长基因的植物表达载体，完成了测序确认。利用农杆菌介导法转化烟草，在抗性筛选培养基上获得了50 多株转pac 1 基因烟草植株，完成了转基因烟草的PCR 鉴定并获得T1 代种子。随着对辣椒的生物学特性的进一步研究，有望建立起辣椒的遗传转化体系。