[00116334]调查陕西省粘质沙雷菌产酶性耐药性的基因分型

本项目属临床、实验相结合的研究项目。院内感染是近年来国际医学界重点研究探讨的课题,细菌的耐药性是病原微生物对人类的严重挑战,产酶菌株、多重耐药菌迅速蔓延波及全球,对人类造成严重威胁,美国微生物学专家预言,“21世纪末人类将可能被耐药性细菌毁灭”。所以耐药性细菌的研究,已成了全人类必须面对的严酷形势和重要任务,也是社会关注和支持的热题。我们在工作中遇到的粘质沙雷氏菌耐药者很多,我们以把粘质沙雷菌的产酶性耐药性及基因分型进行了研究,为临床用药提供很大的帮助。减少不必要的用药故我们做了本文的研究设计。现就本实验研究工作作以下简介： 目的 研究碳青霉烯类抗生素耐药的粘质沙雷菌的基因分型及粘质沙雷菌的耐药性是否与细胞的主动外排机制及细菌膜蛋白缺失有关。方法 收集2010-2014年15株咸阳地区对亚胺培南和美罗培南耐药的粘质沙雷菌株,应用PCR扩增和DNA序列分析,确认引起粘质沙雷菌耐碳青霉烯酶的基因型;将粘质沙雷菌与大肠埃希菌进行结合,并测定结合后大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的MIC值及 应用PCR扩增和DNA序列分析,采用Etest试验观察氰氯苯腙（CCCP）对亚胺培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,以研究细胞内是否存在主动外排机制和膜蛋白缺失现象结果 PCR检测结果9株（9/15）携带KPC-2基因,1株（1/15）携带IMP基因,1株（1/15）携带VIM基因,接合实验使大肠埃希菌与粘质沙雷菌有相似的耐药谱及当CCCP存在时,其中7株粘质沙雷菌亚胺培南,美罗培南的 MIC 值下降,提示存在主动外排机制的菌株。其中有1株OprD2 蛋白缺失,1株外排泵MexB基因阳性。结论 耐碳青霉烯酶的粘质沙雷菌的主要耐药基因为KPC-2,IMP-2,VIM,是引起粘质沙雷菌耐药的主要原因。接合实验阳性提示耐药基因通过接合转录的方式在不同种属细菌间进行传播,应加强院感监测和预防。及耐碳青霉烯类药物的粘质沙雷菌的耐药性与细胞的主动外排机制和膜蛋白缺失有关 。 创新性： 1、粘质沙雷菌耐药者居多,且多重耐药。 2、研究其产酶性,发现其产多种酶。 3、用PCR的方法检测KPC的基因型,检测KPC酶是否为陕西地区粘质沙雷菌耐碳青霉烯酶的主要耐药机制,并检测外膜蛋白是否缺失,主动外排对多重耐药粘质沙雷菌的研究。 应用情况：本实验研究对临床合理使用抗菌药物提供依据,大量抗菌药物的使用,给社会及家庭带来了沉重的经济负担, 我们研究粘质沙雷菌的产酶现状和耐药性能及联合用药模式为临床治疗粘质沙雷菌提供合理用药的实验依据。避免无效用药使患者免受不必用的抗菌药物对身体的摧残等负面影响,直接和间接降低经济损失,为社会及患者家庭减轻经济负担,有良好的经济效益和社会效益。减少耐药菌的产生,对控制院内感染有重要意义 获奖情况：2013年获咸阳市科学技术奖二等奖;2015年咸阳市科学技术奖三等奖。