[00116341]茸毛偃麦草特异种子蛋白基因对小麦加工品质效应及优质小偃麦新材料创制(重点)

本项目取得成果主要是： 1、偃麦草1St染色体精细荧光原位杂交和高通量分子标记的建立。 利用偃麦草端部重复序列Oligo-pSt122探针（Li et al. 2016）,偃麦草转座子序列开发的偃麦草特异序列Oligo-B11探针（Yu et al. 2019）、小麦rDNA重复序列探针Oligo-pTa71,结合Oligo-pSc119.2、Oligo-pTa535探针（Tang et al. 2014）的多重顺序非变性荧光原位杂交技术（ND-FISH）,构建了茸毛偃麦草1St染色体的分子细胞遗传学精细定位。利用SLAF对小麦-偃麦草1St代换系测序,比对小麦基因组序列,发掘了1St染色体区段特异的高密度PCR标记（Li et al. 2016）。用于小麦-偃麦草1St杂交后代渐渗系的高效率鉴定。应用高抗条锈病的小麦-茸毛偃麦草染色体1St#2（1D）代换系AS1677,与感病小麦品种绵阳11杂交,我们选育了具有相同遗传背景的,包括1St#2附加、1St#2S.1DL、1DS.1St#2L易位系、1St#2S.1St#2S和1St#2L.1St#2L等臂二体附加系等茸毛偃麦草1 2.、小麦-偃麦草1St易位系与川麦62杂交后代群体的构建。 将携带1St特异高分子量谷蛋白亚基的1DS.1StL和1St特异醇溶蛋白的1StS.1DL易位系,分别与川麦62,杂交回交,获得高代品系。利用开发的1St染色体特异探针,进行多探针原位杂交,准确鉴定1St片段的导入和变异,综合利用Oligo-pTa71（红）、Oligo-pTa535（红）、Oligo-pSc119（绿）、Oligo-pSt122（绿）的寡核苷酸多重探针的ND-FISH技术,对杂交后代进行单株FISH核型鉴定,同时发现川麦62具有小麦5BS.7BS,5BL.7BL纯合易位（Wang et al. 2018）,同时在杂交后代中鉴定5B-7B易位的传递状态。研究发现1St易位和5B-7B易位具有较好的传递频率。同时发现川麦62的5B-7B可以诱导新型染色体易位的产生。 3、 偃麦草1St染色体片段特异种子蛋白位点与抗性与农艺性状的聚合,辅助进行抗病优质育种。 利用种子醇溶蛋白和谷蛋白电泳方法,利用半粒法的APAGE和SDS-PAGE电泳分析,结合高通量的ND-FISH方法,对1St易位系与川麦62杂种后代的高代品系进行精细鉴定。对高代株系,利用波通公司的近红外品质测定仪进行DA7200进行测定,明确株系种子的蛋白质含量、面筋含量、沉降值等品质特征。同时对育成株系开展小麦条锈病的抗性鉴定,与农艺性状观察。共选育6个优异株系,具有优质、高抗抗条锈病性和较高单株产量的后代,直接用于育种并提供相关育种单位使用。