[00117253]新型蔬菜西兰苔凝集素的生物活性研究

①课题来源与背景：广州市科信局应用基础研究。 ②技术原理及性能指标：采用硫酸铵沉淀法提取凝集素,通过DEAE-52纤维素离子交换柱层析得到凝集素粗提组分。利用葡聚糖凝胶柱层析（Sephadex G-75）对粗提组分实施进一步纯化得到高纯度西兰苔凝集素BL,采用MALDI -TOF-TOF对BL进行质谱分析,BL与Brassica napus,Brassica nigra,Brassica rapa具有同源性,含有两个肽序列为QQQGQQGQQLQQVISR和VCNIPQVSVCPFQK。凝血试验表明BL的凝血活力为28,最低凝集浓度为0.004 mg/mL,抑菌实验表明：BL对不同的细菌的抑制强度有所差别,并且存在明显的剂量效应,其中对幽门螺杆菌标准菌株和痢疾杆菌 ATCC 48097的抑制作用最强,当凝集素的浓度为0.5mg/mL时,抑制率分别达到了72.3%和67.60%,对铜绿假单胞菌ATCC 27583和大肠杆菌ATCC 44113的抑制作用也较强,对金黄色葡萄球菌 ATCC 26001的抑制作用最弱。利用OriginPro 8求出凝集素对各种细菌的IC50值分别为：铜绿假单胞菌ATCC 27583：173.58 μg/mL,痢疾杆菌ATCC 48097：158.32 μg/mL 金黄色葡萄球菌 ATCC 26001：486.33 μg/mL大肠杆菌ATCC 44113：228.77 μg/mL,幽门螺杆菌标准菌株：143.95 μg/mL。抗癌活性研究发现,BL对不同肿瘤细胞的抑制强度有所差别,并且存在明显的剂量效应,对肝癌细胞HepG2和胃癌细胞 SGC-7901的抑制作用最强,当凝集素浓素为0.5mg/mL时,抑制率分别达到了70.2%和64.1%,对正常肝细胞的抑制作用较弱,说明与癌细胞相比,西兰台凝集素对正常细胞的毒性较小。用OriginPro 8求出得其对各种癌细胞的IC50 值分别为：胃癌细胞 SGC-7901：215.85 μg/mL,乳腺癌细胞MCF-7：350.93 μg/mL,肝癌细胞HepG2：178.82 μg/mL,L02细胞：924.35 μg/mL。 ③技术的创造性与先进性：国内外领先。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性：技术处于实验室研究阶段。 ⑤应用情况及存在的问题：尚未进行中试放大工艺研究。 ⑥历年获奖情况：无。