[00117875]维药草花抗阿尔茨海默病的物质基础及作用机理研究

草花（Gossypium herbaceum L.）是维吾尔医常用药材,在维吾尔医应用历史悠久,具有益心补、安神养神、消肿袪炎的功效。维吾尔医用草花治疗脑弱神疲、心悸心烦和机体炎肿等病症。根据前期。动物预实验证明其有效部位有较好的抗痴呆等作用。为深入研究草花中抗阿尔茨海默病有效部位的物质基础及作用机理,拟采用 HSCCC,CombiFlash 快速制备色谱等现代分离技术,进行有效部位化学成分的分离、纯化及结构鉴定。 1.化合物的提取分离与鉴定（按计划已完成）采用聚酰胺色谱柱,对富集的草花总黄酮进行系统分离,采用氯仿甲醇系统梯度洗脱,得到不同的组分,同时结合HSCCC和凝胶色谱柱,共得到8个黄酮单体化合物,同时对8个化合物进行了HPLC分析及NMR鉴定,确定其结构; 2.生物活性筛选研究： 基本完成： （1）完成了对所得的化合物和有效部位的体外自由基清除作用的研究,包括ABTS和DPPH两种自由基清楚作用的研究;同时对量多的化合物进行了细胞水平的研究,部分化合物及草花总黄酮表现出对氧化应激的PC12细胞具有保护作用;草花总黄酮部分及部分化合物还表现出对Aβ诱导的PC12损伤细胞具有微弱保护作用。 （2）调整了槲皮素及黄酮类化合物对Aβ细胞损伤模型的保护作用及探讨其作用机制,主要原因是在实验过程中发现槲皮素及所分离到的黄酮类化合物对Aβ诱导的PC12损伤细胞具有微弱保护作用,如果用量过大,具有较强的细胞毒性,不能反映实际情况。调整为建立转染NF-κB、AP等基因的报告质粒的HEK293细胞模型和H2O2诱导神经细胞BE2损伤的细胞模型,并用于活性筛选,初步评价其作用机制;应用ABTS和DPPH法评价物质的抗氧化能力。 （3）抗老年痴呆作用机理研究：应用所建立的多种拟AD动物模型,从胆碱能系统、细胞凋亡、炎性反应等方面阐述了草花抗AD的机制。 未按计划完成： 活性化合物的构效关系的研究：主要原因是应用Aβ诱导的PC12细胞损伤模型没有获得活性明显的化合物,具有微弱保护作用的化合物不具有深入研究的科学价值。