[00118759]高产抗生素替代品新型芽孢杆菌素的益生菌菌种选育

益生菌芽孢杆菌素是一种新型的肽类益生菌素,具有安全、稳定、不易产生耐药性等优点,被认为是后抗生素时代的重要抗菌利器。然而,目前肽类益生菌素菌种稀缺,多为原始野生驯化而来,产量很低,无法满足产业化要求。因此,广州市科学技术局资助的广州市科技计划项目科学研究专项“科学（技术）研究专项一般项目”《高产抗生素替代品新型芽孢杆菌素的益生菌菌种选育》（立项编号：201607010197,研究时间：2016-04-01至2019-03-31,）针对目前存在的高产芽孢杆菌素的菌株匮乏,以芽孢杆菌素中的脂肽类抗菌物质为目标,采用高通量筛选、发酵优化、紫外诱变、细胞融合、基因组编辑等技术选育益生菌芽孢杆菌素高产菌种。本项目发表了论文5篇（其中SCI 收录2篇,EI收录 1篇,核心期刊2篇）,申请专利3件,授权专利1件,培养了2位博士研究生、3位硕士研究生和16位本科生,引进人才1位,开发新产品2项和新工艺3项。获得的主要研究结果如下：1.建立了高产芽孢杆菌素抗菌脂肽芽孢杆菌菌株筛选及液体发酵培养技术体系,筛选出2株高产抗菌脂肽的解淀粉芽孢杆菌P1和P6,其发酵液有较强的抑菌活性。同时建立了高通量菌株筛选技术体系CPC-BTB筛选体系和BTB筛选体系,用于产脂肽芽孢杆菌菌株的高通量筛选。2.建立了芽孢杆菌紫外诱变、原生质体融合的新菌株选育技术体系：以解淀粉芽孢杆菌P1和P6菌株为亲本进行紫外诱变育种,通过高通量筛选获得了4株高产脂肽突变株,其芽孢杆菌素总脂肽含量最高提高了92%;以P1和P6的原生质体进行融合,通过高通量筛选得到了融合菌株114,其脂肽产量比亲本P1提高了108.5%;以暹罗芽孢杆菌JFL15和纳豆芽孢杆菌LQG17进行原生质体融合,通过高通量筛选得到了融合菌株F8,其脂肽产量比亲本JFL15提高了60%。3.建立了脂肽高产菌种选育的同源重组及CRISPR-Cas9基因编辑技术体系,为有目的地选育高产芽孢杆菌素脂肽新菌株提供了技术支持。