[00118833]胆管癌的增殖与耐药机制及药物干预的相关研究

本项目得到了国家自然科学基金、福建省卫生厅和厦门市卫生局、厦门市科技局共4方资助,研究起止时间是2005年1月至2012年1月。研究内容包括： 1.发现AIB1在50%的胆管癌癌变组织及细胞株中高表达。进一步通过分子生物学技术对胆管癌细胞株中AIB1进行沉默或过表达,发现AIB1在胆管癌细胞的增殖、对化疗药物的耐受及侵袭等方面具有重要的调控作用。通过对相关机制的研究发现,AIB1可通过提高Akt信号通路的活性来促进细胞的增殖并抑制细胞的凋亡;同时AIB1可作为转录因子Nrf2的辅激活因子来促进Nrf2的转录活性并促进下游靶基因（GPx2、GCLC、GCLM、ABCC2及ABCG2）的表达,从而抑制了细胞内活性氧（ROS）的水平及促进了细胞对药物的排外能力,进而提高了胆管癌细胞对化疗药物的耐受能力。 2.通过对抗癌药物进行筛选,我们发现海洋生物提取物文蛤多肽能使胆管癌的细胞周期发生明显的改变,并在G0/G1期前出现凋亡峰;而河蚬乙酸乙酯提取物不但具有抗氧化活性,且对体外培养的QBC939细胞具有明显的增殖抑制作用,能够改变QBC939细胞周期分布,并诱导QBC939细胞发生凋亡。而相关植物提取物长春花碱具有抑制胆管癌细胞增殖、改变细胞形态及细胞周期分布的作用;而七叶皂苷钠则能通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡抑制胆管癌细胞Hccc9810增殖。另外,化疗药物也显示了较好的抗胆管癌增殖作用,如三苯氧胺呈时间和剂量依赖性抑制胆管癌QBc939细胞的增殖、使细胞形态发生明显变化、使细胞周期阻滞于GO/GI期、且显著诱导细胞凋亡,其通过对 cyclinDl、ER、C-myc的抑制、caspase一3/caspase一9信号通路的激活、Bax和p53蛋白表达的上调机制而行使抗胆管癌作用;另外,索拉菲尼、他莫昔芬等化疗药物也具有体外抗胆管癌细胞增殖的活性。这些实验结论为今后研究高效、副作用少的抗胆管癌新药提供实验依据。 3.通过对胆管癌血清双向凝胶电泳技术的优化,建立了稳定的血清蛋白质分离技术,为进一步的胆管癌血清蛋白质组学研究奠定基础。并采用优化技术对胆管癌患者的血清进行蛋白质组学差异分析,结合MALDI-TOF鉴定出11个有意义的差异蛋白（关于它们的功能和在肿瘤发展中的作用有待于进一步深入研究）,这些蛋白可能成为鉴别胆管癌的肿瘤标记物,为进一步的研究提供依据。 本项目从三个方面对胆管癌发病的分子机制、耐药性及药物筛选等问题进行了深入研究。已发表14篇论文,被SCI收录4篇,总共被引用29次（见论文检索报告）。胆管癌分子机制及耐药性研究结论发表在国际著名杂志《Hepatology》上,（IF11.665）。