[00119076]YabC的甲基转移酶功能及其在大肠杆菌细胞分裂中的作用

本课题来自国家自然科学基金项目,属于生物技术领域。课题立项名称：Yab的甲基转移酶功能及其在大肠杆菌细胞分裂中的作用,课题立项编号：31070046,研究起止日期：2011.01-2013.12. 大肠杆菌（E.coli）细胞内甲基供体AdoMet缺乏时,细胞分裂会受到严重影响,基因序列位于dcw分裂基因簇上的未确定功能蛋白YabC被认为是参与该过程的甲基转移酶。我们采用酶偶联分析技术、通过YabC与分裂异常细胞裂解液孵育、成功地检测到了甲基转移后生成的产物AdoHcy,从而证明了YabC催化甲基转移的功能。在此基础上,我们进一步通过已建立的酶偶联分析系统确定了YabC的甲基转移靶点受体为核糖体30S亚基中16SrRNA。另外,我们还确定了另一种甲基转移酶YraL甲基化转移的过程以及甲基化靶点,发现这两种甲基转移酶对核糖体30S亚基的修饰,与细菌的生长分裂的速度有密切关系。另外,我们根据病原菌和宿主在中间产物SAH和MTA代谢上的显著差异,选取了病原菌特有的代谢酶-S-腺苷高半胱氨酸核苷酶（SAHN）作为抗菌药物的靶点。通过建立的酶偶联技术对SAHN核苷酶的酶活性、反应条件、影响因素、酶反应动力学参数等进行了分析,通过分子模拟辅助设计酶抑制剂、合成了几种有效先导化合物。从而为解决耐药致病菌泛滥的现状、开发新型抗菌药物提供理论和现实依据。