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骨组织的再生要求有三个基本的生物学因素参与:种子细胞;生长和分化因子;细胞外基质材料。这也是组织工程研究中的三大课题。目前骨组织工程仍然难以成熟,其根本原因是种子细胞、生长和分化因子、细胞外基质材料这组织工程三大要素复合体能难以模拟体内复杂的内环境。 理想的种子细胞应该具备以下条件:1.成骨能力明确;2.取材方便,容易获取;3.体外增殖迅速;4.在体外培养条件下,生物学性状保持稳定。成骨细胞主要有四种来源:骨、骨外膜、骨髓、骨外组织。许多研究证明,在众多生物学特征方面,骨髓来源的骨髓间充质细胞(Marrow Stromal Cells,MSCs),优于其他来源的细胞,研究MSCs的细胞周期发现, MSCs中有90%处于G0/G1期,说明MSCs具有高分化潜能,加之取材方便,可以穿刺获得,创伤小,来源充足,故成为目前骨组织工程研究的重点。 正常机体内,细胞周围环境存在大量蛋白、因子、活性分子,上述活性成分综合作用于基质细胞,维持细胞代谢和生长。虽然大量实验研究探讨了多数活性因子、细胞外基质材料,但大多数实验仍局限于单一或数种活性因子,仍难以模拟体内复杂的内环境。前期实验我们也已经证实,在骨组织工程当中, 依靠单一因子或者活性因子来改善骨组织工程的效果是欠缺的, 只有多种活性因子相互优化组合才能使组织工程产生最大效应,富血小板血浆为我们组织工程的改进提供了新的思路,富血小板血浆含有体内丰富的活性因子及活性蛋白,其自身复合生长因子因其最大限度的接近体内实际情况,诸多生长因子组成复杂网络系统序贯调控组织愈合,解决了加人外源性生长因子时存在的排异问题和各种生长因子的比例结构问题。 理想的细胞载体材料,应当尽最大可能地模仿其天然的ECM微结构环境。基于上述,本实验制备了生物衍生骨,其具有天然网状孔隙系统和原骨组织骨盐支架的三维结构形态,类似天然ECM微结构,符合生理需求。 因此,本实验选择富血小板血浆及其生物衍生骨支架材料构建骨组织工程,探讨骨髓基质干细胞在富血小板血浆环境下,在生物衍生骨上的活性及其成骨能力,为组织工程提供试验依据,并为将来的临床应用提供理论支持,并推广应用。