[00119340]流式细胞术淋巴细胞亚群检测对儿童急性上呼吸道感染诊断的应用研究

1.1立项的背景 2014年我院肿瘤专科被评为首家“河南省县级临床重点专科”,医院中心实验室成为县级重点专科的建设主要内容之一。在多方研究之下,成立了肿瘤中心实验室,是豫南地区成立最早、目前唯一一所能够开展人体免疫细胞治疗和流式检测的中心实验室,保证了病人“大病不出县”,在县级医院也能得到到高端的检测与治疗。2017年7月获得“成果评价”,2018年11月,实验室被评为“市级重点实验室”。 1.2立项的意义 为了满足临床需求,把握科技前沿领域的发展趋势,加强引领科研技术的创新突破和应用发展,罗山县人民医院细胞免疫室引进了BD-FACSCalibur流式细胞检测,流式细胞检测包括淋巴亚群的测定。如急性上呼吸道感染,流式细胞术检测淋巴细胞亚群各细胞亚群的变化情况,可初步判断为细菌或病毒感染,同时可以判断患者免疫状态,为临床医生判断病情及用药提供指导,随着进一步对每个患者不同时期的各个亚群变化情况的研究,可以对临床医生判断病情发展及预后有重要指导作用。实验室于2014年5月开展至今,流式细胞检测用于儿科呼吸道感染共计12300余例。急性上呼吸道感染简称上感,为外鼻孔到环状软骨下缘包括鼻腔、为外鼻孔到环状软骨下缘包括鼻腔、咽、喉部急性炎症的总称。广义的上感不是一种单一疾病,而是一组疾病,通常包括普通感冒、急性病毒性咽炎,急性病毒性喉炎、急性疱疹性咽峡炎、急性咽结膜炎和急性咽扁桃体炎等类型。狭义的上感即普通感冒。急性上呼吸道感染70%～80%是由病毒引起的,包括鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、埃可病毒和柯萨奇病毒等。20%～30%的急性上呼吸道感染由细菌感染引起,可单纯发生或继发生于病毒感染后,口腔定植的溶血性链球菌较多,其次为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和葡萄球菌等。 人体接触病原体后是否发病,还取决于传播途径和人群易感性。一般来说,老幼体弱,免疫功能低下者更易发病。儿童由于免疫系统发育不成熟,更易于感染,出现免疫功能紊乱。充分了解淋巴细胞压群的变化及其代表的意义对于临床医生判断病情的发展及预后具有重要的作用。流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群能及时有效的提示急性呼吸道感染性疾病,并对疾病的治疗和预后有重要的临床意义。 二、流式细胞分析发展的趋势 临床流式细胞分析已成为检验医学发展的一个热点,其发展趋势主要体现： 使用流式细胞术进行淋巴细胞亚群分析已广泛应用于临床,在免疫功能评估上起到不可或缺的作用。由于流式淋巴亚群分析涉及多个参数,且多个参数间关系复杂,如何有效解读、判断分析结果,并指导临床疾病、诊断治疗。为了科学、合理地将流式淋巴亚群分析应用于临床疾病的诊断、疗效检测、预后评估等环节。中华医学会儿科分会免疫学组在2019年制定了流式细胞术外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用的专家共识。不久的将来,也将作为常规检查项目,广泛应用于临床。 三、项目实施主要内容、技术关键与创新点 3.1项目实施内容简介 流式细胞检测 淋巴亚群测定：检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标,它总体反应机体当前的免疫功能、状态和平衡水平,并辅助诊断某些疾病,如急性上呼吸道感染、自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等,分析发病机制,观察疗效及检测预后有重要意义。郑州大学第一附属医院、河南省人民医院和郑州市儿童医院分别应用开展此项检测项目。 3.2项目技术关键 流式细胞术是流式细胞仪为检测手段的一项快速、精确地对单个细胞（或生物学颗粒）的理化特性进行多参数定量分析和分选的技术。BD流式细胞仪是集细胞与分子生物学、流体力学、激光技术、光电子技术、计算机技术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。 3.3项目创新点 流式细胞术检测淋巴亚群各细胞亚群的变化情况,可初步判断细菌或病毒感染、免疫状态和提供用药指导。本实验采用的流式细胞术,与国内外报道的红细胞花环直接法、T淋巴细胞亚群McAb联合S-P药盒法,ELISA法,更加方便快捷与准确,更易于在临床上应用与推广.本实验室改进了流式细胞检测技术,免去“溶血后洗涤两次”,缩短了检测时间。 本研究通过流式细胞术检测儿童急性上呼吸道感染患者外周血淋巴亚群表达情况,同时根据临床诊断和治疗情况确定为病毒感染和细菌感染的患者进行分组,分别于健康组进行比较分析,探讨急性上呼吸道感染患者免疫功能的变化及临床意义。