[00119574]地塞米松和环保菌素对OLP TLR/NF-κB信号通路的影响1

口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）是最常见的口腔黏膜病之一,病因尚不明确。临床常见类型为网纹,易发生糜烂,损害呈对称性;病情不易康复,疼痛难忍,给患者带来极大的痛苦。该病的发病机制尚未完全明确,目前的研究表明,其发病与精神因素 （如疲劳、焦虑、紧张）、免疫因素、内分泌因素、感染因素、微循环障碍因素、微量元素缺乏以及某些全身疾病（糖尿病、感染、高血压、消化道功能紊乱）有关 。 TLRs（Toll like receptors,TLRs）是一种细胞跨膜蛋白受体家族,通过激活靶基因NF-κB（Nuclear factor-kappaB,NF-κB）的表达,调节细胞生长、凋亡,参与免疫应答。研究认为,TLRs/NF-κB信号通路的激活与OLP的免疫和炎症反应密切相关,但是关于该信号通路在OLP发生、发展中作用机制的相关报道还很少。采用药物抑制OLP局部病损发展是OLP药物治疗的重要切入点,局部应用糖皮质激素是一线治疗方法,糖皮质激素局部应用有抗炎、免疫抑制作用。近年来,免疫抑制剂作为二线药物常常糖皮质激素类药物协同治疗OLP,但是糖皮质激素与免疫抑制剂协同治疗OLP的具体疗效及治疗机制尚存在争议。 针对上述问题,本课题组在黑龙江省自然科学基金的资助下,利用先进的分子生物学、分子病理学及细胞生物学技术,首先建立HaCaT细胞TLR/NF-κB信号通路调节模型,检测TLR/NF-κB信号通路活化后相关指标变化,然后通过检测地塞米松和环孢菌素A单独或联合应用时对TLR/NF-κB信号通路以及细胞生长能力的影响,探讨地塞米松和环孢菌素A在OLP中的抗炎效应和机制,最后通过免疫组化方式检测OLP中TLR/NF-κB信号通路相关相关因子和炎性介质的表达,使结果更有说服力。 本研究以外源性配体脂多糖（LPS）刺激的HaCaT 细胞诱导、建立的OLP体外炎性细胞模型为研究对象,从RNA和蛋白水平研究TLRs/NF-κB信号通路在OLP病理过程中的调节机制及地塞米松和环孢菌素A在OLP中的抗炎效应及治疗机制。通过在RNA和蛋白水平检测OLP体外细胞模型中TLRs/NF-κB信号通路中相关基因表达情况,揭示TLRs/NF-κB信号传导通路在OLP炎性病理过程中的作用;进一步验证了OLP细胞模型建立的方法;针对地塞米松和环保菌素对TLRs/NF-кB信号通路调控靶点及机制进行验证,为口腔扁平苔藓的临床免疫治疗带来新的思路。 本研究通过建立口腔扁平苔藓TLR/NF-κB信号通路模型,首次在细胞水平研究口腔扁平苔藓TLR/NF-κB信号通路及其在调控炎性介质的机制中的作用;首次针对地塞米松和环孢菌素在TLR/NF-κB通路中的调控靶点及机制进行验证,为OLP的治疗靶点研究提供理论基础,将为OLP的治疗提供一个全新的思路,具有重要的社会效益和经济效益。但由于本实验采取的是体外细胞模拟实验,TLR4/NF-κB P65信号通路的各环节及与其他信号通路之间都可能存在相互促进与抑制的复杂细胞因子网路,因此,尚不能确定TLR4/NF-κB P65信号通路在OLP发病机制中的特异性,仍需多方面、多角度的研究。