[00119582]表观遗传学调控对乳腺癌早期转移的预测作用及机制研究

转移是乳腺癌患者的主要死亡原因,而三阴性乳腺癌是乳腺癌中预后最差的一个亚型。表观遗传包括长非编码RNA（lncRNA）和甲基化等能调节乳腺癌的发生发展,但具体机制尚不明确,因此乳腺癌我们构建了乳腺癌的高转移模型和一个去甲基化的三阴性乳腺癌细胞模型和乳腺癌的高转移模型,对这两个模型高通量测序,筛选出参与调控三阴性乳腺癌转移并且受到甲基化调控的lncRNA,Uc003xsl.1和AFAP1-AS1,我们在体外发现Uc003xsl.1在高转移的细胞中低度甲基化,高表达,受到受DNMT1甲基化修饰, Uc003xsl.1可促进乳腺癌的增殖、迁移和侵袭,进一步机制研究,Uc003xsl.1可以作为诱饵分子,竞争结合NF-κB的抑制因子NKRF,与NKRF蛋白C端R3H功能结构域结合后,占据了NKRF与IL8启动子上负性反应元件（NRE）的结合位点,阻碍了NKRF与NRE的结合,促进IL8的转录,进而促进下游炎性蛋白诱导的三阴乳腺癌细胞转移。AFAP1-AS1主要存在细胞浆中,可以促进三阴性乳腺癌细胞增殖,迁移侵袭能力等增强,可以促进肿瘤细胞干性及间质上皮转化（EMT）能力的增强,在裸鼠体内证实AFAP1-AS1可以促进三阴性乳腺癌增殖、转移。通过BSP克隆测序实验及CHIP实验表明AFAP1-AS1的启动子区域受甲基化调控,主要受DNA甲基转移酶 3B（DNMT 3B）调控。通过RNA Pull Down、RNA IP、Western Blot等实验表明AFAP1-AS1可以与β-catenin结合,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而导致三阴性乳腺癌增殖、转移;进一步深入机制研究表明AFAP1-AS1主要通过作用于β-catenin降解复合物中的Axin及GSK3β,起到稳定β-catenin表达,激活Wnt/β-catenin通路的作用,并主要影响下游靶基因CCND2的表达进而促进肿瘤的增殖和转移。发表SCI文章共8篇,其中高质量文章共3篇专利申请情况1.专利号： 201910148200.4, 抑制 Rac1 表达的干扰 RNA 及在增加乳腺癌化疗敏感性中的应用, 发明人：姚和瑞,许小丁,胡海,李青剑,毕卓菲。2.专利号： 201910145522.3, 抑制 AFAP1-AS1 表达的干扰 RNA 及在增加乳腺癌放疗敏感性中的应用, 发明人：姚和瑞,许小丁,胡海, 毕卓菲, 李青剑。