[00119884]不同表型幽门螺杆菌的致病性差异及其分子机制

本项目属于消化内科学领域。幽门螺杆菌(Hp)是与消化性溃疡和胃癌发生密切相关的致病菌。主要研究了Hp的两个主要致病因子—细胞毒素相关抗原(CagA)和致空泡变性细胞毒素(VacA)的结构和功能，以及依据该致病因子开展的Hp临床诊治研究。 本研究明确了中国部分地区Hp菌株cagA基因和vacA基因表型的特点，及与西方国家标准菌株之间基因表型的差异；对感染Hp中国人群中的Hp vacA基因亚型、cagA基因、VacA和CagA的致病作用和Hp的致病机制提出了与以往研究不同的、独到的见解。完成了Hp及其毒力因子(CagAP-tyr等)在SHP-2活性、Rho家族小GTP酶（RhoA、Cdc42和Rac）和MAPK介导的信号转导通路中作用的研究；完成了阻断Rho家族小GTP酶活性后，对其介导的信号转导通路影响以及CagA蛋白磷酸化、SHP-2、Rho家族小GTP酶活性变化的研究，明确了SHP-2、Rho家族小GTP酶在Hp感染介导的信号转导通路中的作用；完成了Hp和AGS细胞共培养后SGC-7901细胞“蜂鸟”表型改变与细胞骨架之间相互关系的研究；完成了5例中国临床Hp菌株的vacA基因全序列及24例vacA信号序列的测定，明确了中国菌株与欧美菌株vacA基因存在等位差异；建立了检测Hp诱导胃上皮细胞IL-8转录活性的荧光素酶活性测方法。 本研究创建了一切套切实可行的Hp液体培养和VacA毒素提取的方法；建立了PCR检测Hp vacA基因型和cagA基因方法以及Hp cagA基因3可变区基因测序方法，对Hp的CagA蛋白进行了分型确定CagA蛋白EPIYA基序的数目。建立了Hp菌株与AGS细胞共同培养后，AGS细胞内CagA蛋白磷酸化(CagAP-tyr)测定方法（Western Blot方法）。建立了Hp及其毒力因子对SHP-2、Rho家族GTP酶介导的信号转导通路的研究技术。这些方法敏感性高，特异性强；达到了预期的效果，并在我院、盐城市第一人民医院、常州市第二人民医院、镇江第一、第二、第四人民医院、镇江市中医院推广了相关技术，取得了较好的社会效益和社会效益。 本研究共发表论文、论著52篇（其中SCI收录期刊10篇，核心期刊27篇），综述4篇。共被SCI论文引用65次，其中他引65次，27篇论文被CNKI数据库收录，共被引104次，其中自引13次，他引91次。