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1、课题来源与背景《赤霉酸A4,A7原药》是江西核工业瑞丰生化有限责任公司(瑞丰公司)和新瑞丰生化有限公司(新瑞丰公司)先后设计研发完成的生物技术领域重大科研成果。2、技术原理及性能指标赤霉酸A4,A7原药生产工艺原理与流程为:赤霉酸A4,A7是赤霉酸A4,A7突变型菌株在发酵过程中的代谢物,工业上采用深层、通气搅拌三级发酵培养生产。经摇瓶种子接种于种子罐,再移至发酵罐进行三级发酵培养,并保持一定罐温、罐压,通入适量无菌空气,并不断搅拌,中期补入适量的C源和消泡剂,发酵至菌丝开始自溶时放罐到提炼。发酵液经预处理和板框过滤去除菌丝体,滤液经薄膜浓缩(或纳滤浓缩)后得到水相浓缩液,利用赤霉酸A4,A7在水中溶解度较小,而在酯类溶剂中溶解度较大的性质,在酸性条件下,用乙酸乙酯对水相浓缩液进行萃取,得游离型赤霉酸A4,A7,经过真空浓缩得到糖浆状A4,A7产品母液。然后对母液进行脱水脱色、蒸干乙酯后进行溶剂转换,加成盐试剂使赤霉酸A4,A7由游离型酸转为盐结晶(此时杂质仍留在液相中,绝大部分杂质被除去)、然后用乙醇溶解其盐,调节PH至酸性,使赤霉酸A4,A7盐恢复成为游离型,因其难溶于水而结晶析出,再经过洗涤、干燥,得到赤霉酸A4,A7原药。应用其工艺技术发酵水平已达750r/ml以上,提炼精粉收率已达63%以上,所获得的赤霉酸A4,A7原药,其有效成分A4,A7含量达90%以上。3、技术的创新与先进性通过原生质体诱变筛选,A4,A7生产用菌种发酵水平提高了50%,对降低成本和保证产品质量提供了有力的保证。本项目开发了对菌种分泌的A4与A7的比例控制的发酵工艺,通过采用无机氮自动控制工艺来控制发酵的PH等生化指标获得了成功,可以有效的对产品的组份比例进行控制,因而适应不同应用需要的能力更强。我们所开发的赤霉酸A4、A7原药精加工工艺采用先进的超纳滤膜工艺,可以在浓缩料液的同时去除更多的杂质,因而最终得到了含量90%以上的A4,A7原药。4、应用情况及获奖情况2006年A4,A7原药生产共113罐批,平均发酵放罐效价759r/ml,平均发酵指数为6.91r/ml.h,平均提炼收率为63.5%,A4,A7原药单罐(20吨罐)产量为9.3kg/罐,原药中A4,A7平均含量为91.5%,均超过90%,原药单位生产成本为2925.5元/kg,加上包装成本、销售费用、管理费用,A4,A7原药的全成本为3600元/kg。2006年新瑞丰公司共销售A4,A7原药1056kg,平均每公斤售价6000元,新增销售收入633.6万元,新增利税253.4万元。产生的经济效益非常显著。2005年《赤霉酸A4,A7中试》获得江西核工业地质局优秀科技成果三等奖;2008年《赤老酸A4,A7原药》被评为2007年度江西省优秀新产品一等奖。