[00120142]一株植物内生枯草芽胞杆菌TR21及其应用

本发明专利提供一株对植物病原菌具有广谱拮抗能力的枯草芽胞杆菌TR21菌株（Bacillus subtilis str.TR21）,本菌保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No：M 2010019。该菌分离自双色石斛兰叶片,革兰氏阳性,菌体杆状,产芽胞,生长需要氧气。在NA平板上的菌落形态是老龄菌落金黄色、表面光滑较粘稠,有时出现皱褶,在PDA平板上菌落初期表现出脓状,后期变成干燥皱缩,菌落出现明显的扩展能力。对其生理生化性质进行详细研究发现,该菌接触酶和氧化酶实验阳性,能在0.001%溶菌酶下生长,具有水解淀粉、酪蛋白、尿素、吐温80的能力,能够利用柠檬酸盐,具有糖酵解和硝酸盐还原能力,产硫化氢、不产苯丙氨酸脱氨酶,V.P反应阴性,不能利用苹果酸和甘氨酸、酪氨酸,不能利用阿拉伯糖产酸,不产生二羟基丙酮;生长温度在10～50度之间,pH值范围为pH5.0～pH9.0,最适pH值为6.0,培养2h左右进入对数生长期,12h左右进入稳定生长期。最佳氮源为酵母浸提物,最佳碳源为葡萄糖。经过Biolog和API鉴定以及16S rDNA、gyrA和gyrB基因片段的进化树分析,最后将其鉴定为一株新的枯草芽胞杆菌菌株。 对其抗菌谱进行测定发现该菌能够对多种植物病原真菌具有很好的平板拮抗活性,尤其对尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、交链孢霉等土传维管束病害有很好的拮抗能力,并在田间表现良好的防治效果。在田间广泛开展了对香蕉和西芹的田间防治实验,结果显示对巴西蕉（香蕉,感病品种）2年综合防效达64.57%;喷施叶腋对农科1号（香蕉,抗病品种）的防效达85%;对皇帝蕉（香蕉,感病品种）的防效达82.09%;对西芹黄萎病的防治情况是即使在较低活菌浓度的情况下,防效也可达60%以上。 对其防治机理的初步研究发现,TR21菌株会分泌抗菌蛋白和脂肽从而抑制植物病原菌的生长,并能够通过根系伤口进入香蕉体内,定殖到球茎和根系,并在根际土壤中形成一定的种群。