[00121009]碱提法高效提取植物硒蛋白的方法

一、课题来源与背景 1、课题来源：“广西富硒功能农产品研发关键技术引进与创新”（桂科合15104001-22）由广西壮族自治区科学技术厅下达,广西农业科学院农业资源与环境研究所承担,实施时间2015年1月至2017年12月。 2、课题实施背景：硒是人和动物的必需微量元素之一,是长寿元素、生命的火种;硒可分为有机硒和无机硒,无机硒占硒总量的8%,有机硒占硒总量的80%以上,在生物体内发挥作用的主要是有机硒化物。大米的成分有脂类、水分、淀粉和蛋白质,其中淀粉和蛋白质是大米的两大主要成分,硒蛋白中的硒主要以硒代甲硫氨酸存在,要准确检测其中硒含量,必须找到合适的硒蛋白提取方法,提取出硒蛋白。 3、背景技术：目前硒蛋白主要提取方法有溶剂提取法、柱分离技术、生物学方法、辅助提取技术等。其中有机溶剂提取法中应用最广的是碱提法,但是碱提法存在着硒蛋白流失严重的问题。因此,研究一种具有高效提取硒蛋白的方法具有广阔的市场推广价值。 二、技术原理： 本发明专利提供了碱提法高效提取植物硒蛋白的方法,其特征在于：包括以下步骤：（1）前处理：按重量份数计,将150～200份富硒大米放在800～1000份去离子水中浸泡8～12h后,取出研磨成浆,加入1～3份酵母,将全部材料放入发酵罐中,在25～35℃下发酵2～3天,然后在40～52℃下液化3～6h,得到发酵后的浆液;（2）提取、沉淀：按重量份数计,将20份发酵后的浆液、1份促进剂和100～125份碱性溶液放入反应器中,在80～95℃下回流反应10～12h,然后以1～3mL/min的速度加入4倍发酵后的浆液体积的冰丙酮,置于-27～-17℃的环境中,在超声波的声能密度为15～25W/mL的辅助处理条件下,放置3～5h以进行硒蛋白沉淀,然后在2～5℃下以10000～20000r/min的速度离心10～15min,最后取出沉淀物并进行喷雾干燥后,得到硒蛋白成品;步骤（2）所述的促进剂由下述方法制备：按重量份数计,将100份苯乙炔、5～10份过硫酸钠和10份质量分数为10～20％的氯化铜溶液放入反应器中,在温度为50～65℃和搅拌速度为100～300r/min的条件下反应10～15h,然后用四氯化碳溶液进行萃取,取出机层物质,在真空度为0.05～0.07MPa的条件下进行减压蒸馏12～24h,得到促进剂α,α-二氯苯乙酮。 三、技术的创造性与先进性 1、本发明能够高效制备富硒大米植物硒蛋白。所采用的各个技术手段相互作用、相互配合、层层递进,能够共同促进后续的提取步骤的进行,提高了提取效率,所产生的总体效果远远高于单个技术手段所产生的效果的简单加和。 2、本发明采用在超声波辅助处理、促进剂作用和碱性溶液环境的条件下,使用冰丙酮在低温环境中对植物硒蛋白进行沉淀,不仅能高效的沉淀植物硒蛋白,还可以使植物硒蛋白的纯度提高,进而有利于人体吸收。 3.本发明所制备的促进剂能够更高效的促进碱性溶液对于植物硒蛋白的提取,进而提高提取效率。 四、技术的成熟程度,适用范围和安全性 本发明专利的目的是提供碱提法高效提取植物硒蛋白的方法,不仅能够减少植物硒蛋白的流失率,提高植物硒蛋白提取率的同时,还能提高植物硒蛋白的纯度。可应用于植物硒蛋白的提取,安全可靠、高效实用。 五、应用情况及存在的问题 目前,除了在“广西富硒功能农产品研发关键技术引进与创新”（桂科合15104001-22）项目实施中得到应用外,在我们其他项目的植物硒蛋白提取中也得到应用,应用效果非常好。