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“一种海藻降解液的生产技术”成果属于生物发酵技术领域,产品主要应用于海藻加工及应用行业。 该项目将生物技术和海藻结合在一起,采用生物发酵法降解海藻,开发出了一种海藻降解液的生产技术。主要技术内容如下: (1)胶质芽孢杆菌的分离筛选和分类鉴定 从胶南蔬菜大棚获得的土样中分离纯化得到18株纯菌,所得菌株挑选单菌进行摇瓶发酵,所生长速度及均属进行比较,菌株J-2在1%泡叶藻培养基中生长稳定且菌数较高。菌株J-2形态特征:菌落大小10-18mm,无色透明,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,显微镜下观察菌体为杆状,芽孢中生,有夹膜,革兰氏反应阴性。 分子遗传学分类鉴定:提取菌株J-2的DNA,以该DNA为模板进行扩增,将克隆后的样品进行测序。选取相似性较高的菌株,利用Mega4.0软件构建系统进化树,结果显示,菌株J-2与胶质芽孢杆菌亲缘关系最近。同时结合菌株的形态学特征和生理生化特性,将其归类为胶质芽孢杆菌。 (2)胶质芽孢杆菌降解海藻的工艺优化 优化发酵培养基,通过调节碳源、氮源、海藻添加量、发酵温度等条件来优化产酶条件。 优化发酵培养基配方:海藻50-100重量份,蛋白胨6-10重量份,氯化钠1-2份,KH2PO4 0.5-1重量份,MgSO4 0.1-0.5重量份,调节pH至7-8。发酵后酶活:纤维素酶48.5U/mL,蛋白酶活4.5U/mL,褐藻胶裂解酶活为0.853U/mL。降解海藻工艺:分别取50公斤泡叶藻、70公斤马尾藻、30公斤海带按不同的比例添加水进行浸泡,浸泡时间10-15个小时,将浸泡好的海藻打碎研磨,配制好培养基后接种胶质芽孢杆菌并发酵,发酵参数为:温度32℃,pH7.0,120rpm0-4h;150rpm4-20h;180rpm20-24h,罐压0.02-0.03MPa。 所得产品指标:海藻酸含量≥15g/L,海藻低聚糖≥5g/L,还原糖≥2g/L,氨基酸≥1g/L,海藻残渣≤1%,纤维素酶活≥48.5U/mL,蛋白酶活≥4.5U/mL,海藻胶裂解酶活≥0.885U/mL,有效活菌数≥2.0×109cfu/mL或(cfu/g)。 (3)海藻降解液用于动物饲养效果验证 取所得海藻降解液用于动物饲养,在山东省胶南市养殖场选取150只1龄日的黄羽肉仔鸡平均分为A、B、C三组,每组50只,其饲养情况分别为:A组喂养基础饲料;B组喂养添加3%海藻粉的基础饲料;C组喂养添加3%海藻降解液的基础饲料。 可见海藻降解液添加到动物饲料中,可改善动物的营养结构,提高饲料的利用率,提高免疫力和抗病力,促进生长。