[00121188]石斑鱼TLR13识别及抵御副溶血弧菌感染的免疫机制研究

①课题来源与背景斜带石斑鱼是我国华南地区及东南亚国家重要的海水经济养殖鱼类之一。随着养殖规模的不断扩大及养殖环境的持续恶化,由病毒,细菌和真菌感染引起的石斑鱼疾病也越来越多。石斑鱼病严重阻碍了石斑鱼养殖业的发展,并引起了巨大的经济损失。针对副溶血弧菌感染所造成的疾病,目前主要的防控技术是使用抗生素类药物。抗生素的滥用对于水体乃至养殖环境都造成了极大的危害,同时也为水产养殖甚至人类健康带来了潜在的危险。 ②研究目的与意义本研究以斜带石斑鱼为研究对象,开展关于斜带石斑鱼识别及抵御副溶血弧菌的感染机制的研究。旨在掌握上述免疫机制的基础上,开发新型的弧菌防控技术并应用在斜带石斑鱼的弧菌病防控上,以使石斑鱼能够安全高效的抵御副溶血弧菌的侵染。 ③主要论点与论据通过一系列研究我们已经证实了EcTLR13确为斜带石斑鱼的针对副溶血弧菌感染的天然免疫受体;其能够识别副溶血弧菌的RNA,且主要的识别区域是副溶血弧菌23srRNA上的一段特异的序列;识别的方式是直接结合,点突变第4位氨基酸A为G并不能影响二者之间的结合。当过表达EcTLR13的GS细胞遭受特异性识别配体的刺激后,会诱发免疫信号通路的激活并引起IL-6、IL-12、IL-1β、TNFα等细胞因子的表达;用siRNA的方式沉默掉TLR13后,上述各细胞因子的表达呈现相反的趋势。细胞免疫荧光实验显示,EcTLR13能够与早期内体及内质网共定位,EcUNC93B1的定位情况与其相同,说明EcUNC93B1能够通过调节EcTLR13的转运来参与其介导的信号通路。 ④创见与创新通过本项目开展,我们证实EcTLR13特异识别的副溶血弧菌关键组分为细菌23S rRNA,EcTLR13能够参与免疫信号通路的激活并引起IL-6、IL-12、IL-1β、TNFα等细胞因子的表达,阐明了石斑鱼TLR13特异识别副溶血弧菌RNA的免疫调节及抗菌机制。发表SCI收录论文5篇;申请发明专利3项;培养博士研究生1名,硕士研究生2名。 ⑤社会经济效益,存在的问题目前对副溶血弧菌等弧菌病的防治主要依赖抗生素,由于长期大量不合理使用,已引起弧菌的耐药性,不但造成水体污染,而且可能带来水产品药物残留的问题,对食用人群的身体健康造成危害。本项目深入了解副溶血弧菌对海水鱼类,尤其是名贵海水养殖鱼类的致病机理及鱼体的抗菌机制,为新型、高效、安全的副溶血弧菌防控技术的研发奠定了坚实的理论基础。 ⑥历年获奖情况“重要南方海水养殖鱼类良种培育及应用”于2018年9月27日获得广东省农业技术推广奖一等奖,项目负责人排名第八。