[00121203]芒果HMGR基因、用于克隆芒果HMGR基因的引物及其克隆方法

1.课题来源与背景 芒果（Mangifera indica）属于热带、亚热带水果,与柑橘、香蕉、葡萄、苹果并称世界五大水果,素有“热带果王”之美誉。我国已引进和培育了200余个芒果品种和品系。香气是芒果风味的重要组成部分,是评价芒果重要特性品质的指标。香味丧失会严重影响芒果的感官品质,从而影响市场价值。研究发现,萜类物质是芒果主要的风味物质,占总挥发性香气物质的70%～90%。植物类萜化合物的生物合成途径共有2条,分别是甲羟戊酸（MVA）途径和丙酮/3-酸磷酸甘油醛代谢（EMP）途径。3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR）属于MVA途径中的一个关键酶,催化HMG-CoA产生甲羟戊酸 （mevalonic acid,MVA）,这步反应是不可逆的,因此HMGR被认为是MVA途径中第一个重要的 限速酶,也是MVA途径的重要调控点。研究表明,HMGR基因在很多植物中 以基因家族的形式存在,目前在苹果、番茄、菠萝、荔枝等植物 中克隆出该基因,但是在芒果中HMGR基因的研究至今还未发现有报道。因此,克隆芒果HMGR 基因是相当有必要的,为后续深入研究芒果HMGR基因在果实成熟期间香气形成的特异性表达提供基础。 2.技术原理及性能指标 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种芒果HMGR基因、用于克隆芒果HMGR基因的引物及其克隆方法,该基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1;克隆步骤：对芒果的总RNA进行提取和逆转录合成cDNA第一链;芒果的HMGR基因5′RACE和3′RACE扩增;芒果的HMGR基因全长cDNA扩增;PCR克隆产物的纯化与筛选。 3.技术的创造性与先进性 本发明方法首次获得芒果HMGR基因的cDNA序列全长,同时通过一种克隆芒果HMGR基因的引物组和克隆方法,它能快速准确地克隆芒果HMGR基因的编码序列,为后续芒果HMGR基因分子研究提供了理论基础。 4.技术的成熟程度,适用范围和安全性 本发明涉及农产品保鲜技术领域,具体涉一种芒果HMGR基因、用于克隆芒果HMGR基因的引物及其克隆方法。 5.应用情况及存在的问题 （1）应用情况 在广西南宁应用。 （2）存在问题 无。