[00121384]DNA-PKcs基因在斑马鱼胚胎期重离子损伤与修复中的功能研究
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技术详细介绍
重离子已广泛应用于生产实践中,但对重离子诱导的DNA损伤和修复特别是胚胎期的分子机理缺乏研究。本项目利用斑马鱼为模式分析了非同源末端修复的核心基因DNA-PKcs在胚胎期重离子损伤与修复中的功能。目前对DNA-PKcs的功能研究主要在集中在细胞水平,体内的功能研究较少,特别是在胚胎发育中的功能,同时该基因在哺乳动物体内的表达研究也很少,但该基因在整个修复过程中发挥着核心作用,所以对该基因在早期发育过程中的表达区域及其功能的研究非常重要。在本研究中我们在斑马鱼中,克隆和鉴定了DNA-PKcs基因,进化树分析表明克隆到的该基因为哺乳动物DNA-PKcs基因的同源基因。RT-PCR结果表明该基因在胚胎发育不同时期和成体的不同组织中都有表达。原位杂交和免疫组化发现该基因在受精48小时后,仅在晶状体中表达,表明该基因在晶状体的发育和DNA修复过程中可能具有重要作用。该研究首次揭示了DNA-PKcs基因在脊椎动物早期胚胎发育过程中的表达,为后续的基因功能研究奠定了基础。
