[00122029]黄原胶原料药发酵工艺研究

黄原胶是人类研究最深、商业化应用程度最高的微生物胞外多糖。黄原胶注射液药效预实验显示了对治疗骨关节炎有更大的优势,可有效减少注射次数,减轻病人痛苦和降低治疗成本。为了将黄原胶开发为治疗骨关节炎的1.2类新药,就需要进行黄原胶原料药的制备工艺和质量标准的研究。本项目的主要研究内容包括： （1）黄原胶生产菌株的诱变筛选。利用紫外诱变获得一株黄原胶产量较高的优良菌株。 （2）高产黄原胶基因工程菌构建。我们在gumD过表达载体中又插入了vgb基因,构建了新的基因工程菌,通过提高菌株结合氧的能力,进一步了提高黄原胶的产量。 （3）黄原胶的发酵工艺研究。工业化生产角度出发,选用廉价易得的原料,由甘蓝黑腐病黄单胞菌发酵,对黄原胶发酵工艺进行优化,包括培养基的优化和培养条件的优化,确定中试规模的黄原胶原料药发酵工艺,黄原胶发酵产量达到35g/L以上,黄原胶分子量560万左右。 （4）黄原胶的大规模精制技术研究。对多种常用于多糖类药物纯化的单元操作的不同组合进行筛选,确定能够生产注射级黄原胶原料药的大规模精制工艺。精制得到的黄原胶具有良好的耐热性（1%黄原胶水溶液121℃高温处理30min,黏度不降低）,其溶液澄清透明（0.33%溶液A600=1.4×10-3）。 （5）在国内外首次开展了黄原胶药用原料的质量研究,并制定了黄原胶质量标准草案,通过长期试验考察注射级黄原胶原料药的稳定性。