[00122456]无规定疫病区建设保障技术-小鹅瘟鹅副粘病毒病的防治和诊断技术的研究与应用

一、任务来源：　　该课题是吉林省科委委托计划项目。编号为吉科合字20000212-01号。二、应用领域：　　该项目成果可应用于全国养鹅业。三、A技术原理：　　是根据疫苗抗原接种动物体后可刺激机体产生能中和该病原体的抗体，达到防病的目的；并且这种抗体又能用来检测相应抗原（病原体）的免疫学原理。研制出安全性好、保护率高的疫苗和特异快速的诊断方法。性能指标：　　1.小鹅瘟油乳剂灭活苗（GP油苗）：主要性能：该苗可免疫产蛋前的种鹅和雏鹅，即安全又快速产生免疫力。安全性好：雏鹅接种2ml，成鹅接种5ml，观察15天健康存活。保护率高：雏鹅接种14天攻毒保护率80%，接种20天后保护率为100% 。免疫期达3个月。成鹅接种15天其后代保护率为100% ，免疫期可维持6个月。已完全达到合同要求指标。2.小鹅瘟免疫程序：根据免疫学原理和研制的小鹅瘟油苗、抗血清的性能结合目前养鹅实际生产条件研究制定出了能普遍应用的免疫程序即：种鹅产蛋前半个月～一个月时接种GP油苗1ml/只；未免疫的雏鹅出壳后尽早接种GP抗血清0.5ml/只，同时接种GP油苗10天后即可产生坚强免疫力。3.小鹅瘟综合防治示范区的建设方法：在成功研制GP油苗和抗血清基础上，及时进行田间推广扩大试验，不断的总结、提高、完善，研究制定出一套简便、易行、广泛适用的“GP综合防治方法”，并以此为基础制定出的地方标准“吉林省小鹅瘟防治技术规程”，从“引种：坚持自繁自养严格防检疫引种-种鹅、雏鹅的免疫程序-病鹅群的处理”做了简而精的阐述。从而为建设无GP示范区奠定了理论基础，并以公司+基地+农户的管理模式建立了示范区。如：吉林省德莱鹅业集团示范区：德惠基地、九台基地；吉林省农科院示范区：磐石市明城镇；内蒙古赤峰市的两个鹅业有限公司的两个基地，涉及范围为两个乡镇。　　与国内外同类技术相比较：该项目成果有如下几点创新，体现了先进性。1.国内第一次比较系统、完整的对GP油苗进行了研究并进行较大规模的田间扩大试验，免疫原性和安全性等都超过了同类产品的指标。2.国内外第一次研究总结提出适合广大养鹅区的免疫程序。使被动免疫和主动免疫联接起来，消除了免疫空白期。3.在国内第一次为防治GP建立示范区，制定了切实可行的防治GP技术地方标准，建立了德莱鹅业、吉林省农科院畜牧所、赤峰莱茵特等示范区，起到了GP防治示范区的作用。由于上述细致的工作，在省内外建立了示范区，共免疫292万只鹅，控制了小鹅瘟（GP）病的发生、流行，增强了养鹅单位、养殖户的养鹅信心，已创造千万元的经济效益，相信今后的推广应用中，必将产生更大的社会效益和经济效益。四、B技术原理：1、根据特异性抗原刺激机体产生特异性抗体，从而产生免疫中和抗体，达到保护动物免受病原体的攻击而发生和流行传染病的原理，研制出安全性好、保护率高的二联油乳剂灭活疫苗。2、应用20nm胶体金标记纯化的兔抗鹅副粘病毒IgG，制备免疫胶体金探针试剂，快速、灵敏检测出病鹅粪便中的鹅副粘病毒；制备的诊断试纸条简便易操作，在鹅副粘病毒病快速诊断方面具有很好的应用价值。性能指标：1、小鹅瘟-鹅副粘病毒病二联油乳剂灭活疫苗主要性能：该二联疫苗可免疫产蛋前的种鹅或雏鹅，既安全又快速产生免疫力。安全性好：2日龄雏鹅在2倍使用剂量免疫后，精神、食欲均无明显异常，种鹅4倍使用剂量免疫后，精神及食欲无异常，14天内全部健活。剖检观察注射部位未见明显的疫苗注射痕迹，疫苗吸收良好，内脏未见出血性变化和其他病变。保护率高：该复相二联灭活苗抗体产生快，保护率高。免疫种鹅，10天即可产生免疫力。一次接种0.5mL，其后代雏鹅保护率为100%，免疫保护期达6个月以上；对1日龄雏鹅一次接种0.25mL，14d可产生坚强免疫力，免疫后14d攻毒保护率达100%，至24周攻毒保护率仍达100%，至32周攻毒保护率开始有不同程度的下降，表明免疫保护期可达6个月。已完全达到合同要求指标。　　与国内外同类技术相比较：该二联灭活疫苗有如下几点创新，体现了先进性。(1)在国内首次研制水包油包水型复相油乳剂二联灭活疫苗，并制定了疫苗制造规程，疫苗的安全性、免疫保护率等都超过同类产品的指标；(2)该复相疫苗吸收好，无毒副作用，种鹅免疫后产生保护时间早于同类产品。(3)对分离的鹅副粘病毒进行了全面的生物学（尤其是MDT、ICPI、IVPI指标测定）、分子生物学特性（F和HN两个主要糖蛋白基因克隆和序列分析，F蛋白基因的表达及表达蛋白的免疫原性的测定）鉴定，疫苗种毒背景资料清楚，且免疫原性良好。2、鹅副粘病毒病快速特异诊断方法的研究　　应用胶体金免疫电镜技术检测鹅副粘病毒和诊断试纸条的研制与应用主要性能：该技术用于鹅副粘病毒病的快速、特异诊断。简便快速：制备的诊断试纸条便于基层广泛应用，简便而容易操作，达到快速诊断的目的。特异敏感：由于免疫胶体金法在电镜视野中无论是单个病毒还是聚集病毒周围均有大量胶体金颗粒，示踪物明显，反差强烈，检测时只要观察到胶体金颗粒聚集的地方，就有病毒颗粒存在，大大提高了检出率。适于早期诊断：由于该方法检测的灵敏性高，病鹅早期粪便排毒甚至潜伏期排毒就可确诊，再加上试纸条可在现场即时应用，大大缩短了诊断时间，对于及时防疫本病具有十分重要的现实意义。与国内外同类技术相比较：鹅副粘病毒病是1997年以来在我国部分地区发生和流行起来的，国外尚未见本病的报道。免疫胶体金技术应用于动物传染病的诊断近几年来也陆续有一些报道，但是，应用胶体金免疫电镜技术检测鹅副粘病毒和制备诊断试纸条直接检测病鹅粪便中的鹅副粘病毒，这在国内尚属首次。以上疫苗应用范围广阔，凡养鹅单位都可应用。安全性能良好。现正在推广应用已创造千万元社会经济效益。五、存在问题：　　应继续完善疫苗标准。上报国家规程，扩大推广范围，保证养鹅业的发展。