[00122955]红豆杉中紫杉醇分离、纯化专用色谱填料的开发

紫杉醇是新型的抗癌药物,获得高纯度的紫杉醇产品,是一项具有重要意义的研究工作,目前,紫杉醇的分离、纯化主要存在以下的一些问题：1)工艺步骤多,且易损失产品。从红豆杉中直接提出的紫杉醇粗品在进行紫杉醇精制之前,往往需要经过一系列的初分离步骤,如液-液萃取、硅胶层析等,势必影响到全过程中紫杉醇的收率。因此,简化紫杉醇的提纯工艺,降低成本,是紫杉醇走入市场的一个技术关键。2)步骤难用于规模化生产。无论用哪一种方式来提高紫杉醇的产率,最后往往都需采用高效的方法使紫杉醇的纯度达到规定要求,因而高效液相色谱制备分离（HPLC）过程往往必不可少。但是,到目前为止,HPLC制备分离紫杉醇所采用的色谱填料仍然为常规的C18填料,而常规的C18色谱填料对于进一步纯化紫杉醇往往不太理想,因此研发出一类对紫杉醇具有高效分离、纯化效果的新型色谱填料,对于简化提纯步骤、有效地提高紫杉醇的产率、发展一条简捷、低成本的提取分离纯化路线极为关键。 反相高效液相色谱（RP-HPLC）已被广泛地用于生物、化学、制药等领域,而液相色谱填料是色谱领域研究的重要课题。反相硅胶键合相,特别是像十八烷基键合相、苯基键合相等填料是应用最广泛的反相色谱填料,改变流动相组成,就可以实现大多数有机化合物的分离分析。但是,由于硅胶表面残余硅醇基的影响,分离某些酸性、碱性、芳香环类化合物时使色谱峰变形拖尾,灵敏度降低。为了改善这些目标物的分离,极性基团嵌入静电屏蔽色谱填料越来越引起色谱学者们的广泛关注。极性基团嵌入反相色谱填料是近年来发展起来的一类新型色谱固定相,通过在传统烷基固定相长链根部嵌入酰胺、氨基甲酸酯等极性基团而制备,对具有复杂结构的酸性、碱性、芳香环类化合物表现出不同于传统反相色谱的分离性能。据静电屏蔽原理,在酸性或中性条件下,键合相上极性配体,如胺或酰胺官能团将排斥带正电荷的碱性溶质,抑制了溶质分子与硅醇基之间可发生的离子交换作用,而且键合的官能团与硅胶表面的水合层作用,可给予固定相烷基链高度定向性分配,从而改善酸性、碱性、芳香环类化合物分离度和选择性。鉴于USP药典也规定了紫杉醇的测定规定用五氟苯基柱,本研究拟研发出一种新型的极性基团嵌入苯基色谱填料对紫杉醇分离、纯化,既与药典对紫衫醇色谱分析的填料保持一致,又保证紫杉醇具有较高的总收率并获取高纯度的紫杉醇。该研究旨在开发一种适宜于工业化生产的极性基团嵌入苯基填料工艺,并使之作为紫杉醇的专用分离、纯化填料,以低成本进入国际市场。 本项目以全多孔硅胶微球为基质,氨丙基三乙氧基硅烷（APTS）为连接臂,苯丙酰氯为原料,探索了酰胺基极性基团嵌入苯基反相色谱填料的制备条件。以 APTS和苯丙酰氯代替氯硅烷作为合成介质,可大大降低介质的生产成本,使反相色谱将有可能应用到紫杉醇的工业生产中。其制备的填料表面化学键合有高度亲水的单分子层,可与极性化合物发生相互作用。酰胺基极性基团嵌入苯基反相色谱填料要比常规的正相固定相的极性更强。它还具有中性的特点,因此可用于分离中性或带电的极性化合物。并且,单层官能团化学键合技术有助于获得高效的分离。该固定相高度亲水的性质使其可以用于有机或水系的流动相中。 本产品属于金华市科技计划项目。