[00123181]4-HNE促TNF介导的酒精性肝损伤的调控研究

本研究通过体外细胞实验研究TNF诱导4-HNE致敏肝细胞发生细胞死亡的作用,以期阐明基于NF-κB/ IκBα信号通路4-HNE/TNF协同诱导酒精性肝病的分子机制。结果： ①在HepG2及小鼠原代肝细胞中,与TNF组相比,4-HNE/TNF组肝细胞增殖活性下降,随着4-HNE、TNF浓度的增加,增殖活性呈剂量依赖性降低,细胞凋亡增多,细胞释放的乳酸脱氢酶活性升高（P＜0.05）,4-HNE/TNF组明显诱导PPAR蛋白剪切。 ②在HepG2细胞和小鼠原代肝细胞中,随着4-HNE浓度升高,细胞内4-HNE与蛋白质形成的加合物增多,与TNF组相比,4-HNE/TNF组肝细胞内4-HNE与IκBα形成的蛋白质加合物增多,IκBα的蛋白磷酸化水平降低。 ③随着4-HNE浓度升高,HepG2细胞核内NF-κB （p65）与DNA的结合活性下降,NF-κB调控基因（cFLIP、cIAP、Bcl-2）的mRNA表达水平下降。 ④4-HNE对TNF诱导的IKK无明显作用。 ⑤苯扎贝特通过清除4-HNE来减轻酒精性肝损伤。 本研究结果表明,长期饮酒导致肝细胞内4-HNE和TNF的含量增加,TNF诱导了4-HNE致敏的肝细胞死亡,4-HNE作为一个肝细胞致敏因子,可以通过抑制TNF介导的NF-kB抗凋亡信号通路诱导肝细胞死亡,是ALD发生、发展过程中独立于氧化应激的一个新机制。