[00123929]疏水穿膜肽修饰的紫杉醇纳米递药系统构建与抗乳腺癌作用研究

本研究首先利用化学合成制备导向化合物DSPE-PEG2000-PFV。采用薄膜分散-水化法制备载紫杉醇的PFV-Lip-PTX脂质体。脂质体为粒径在120 nm左右的类圆形粒子,PDI在0.25以下,表面带弱的负电,对紫杉醇包封率大于90%,而且药物从脂质体中释放的速率较慢。以乳腺癌细胞MCF-7作为肿瘤细胞模型,运用流式细胞、激光共聚焦显微技术和HPLC对脂质体进行了体外细胞摄取研究,结果表明PFV修饰的隐形脂质体能够促进香豆素向肿瘤细胞内传递。SRB比色法评价Lip-PTX及PFV-Lip-PTX细胞毒性,表明PFV修饰的隐形脂质体能够显著增强紫杉醇对细胞的毒性。体内分布实验采用小动物活体成像技术考察PFV修饰后脂质体体内的循环效果及在肿瘤组织和各主要器官的分布和蓄积。结果显示相对于未修饰的Lip-DiR组,PFV-Lip-DiR在12小时至48小时后在肿瘤中表现出较强的荧光分布,在48 h后仍很明显。结果表明,PFV修饰脂质体能够增加脂质体在肿瘤组织中的积蓄。进一步体内药效实验表明PFV-Lip-PTX组肿瘤体积及离体肿瘤重量都明显小于Lip-PTX组,显示出良好的抑瘤效果。毒性结果表明PFV-Lip-PTX组的体重下降最少,对主要脏器没有损伤。这表明PFV-Lip-PTX脂质体在增强PTX抗肿瘤效果的通同时,还能减小PTX本身带来的毒性。并且采用LDH释放测定法和共聚焦显微镜观察,评价了疏水肽与阳离子穿膜肽对正常细胞的毒性,结果表明疏水肽的毒性更低。