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本课题为国家自然科学基金面上项目。点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus)是世界上重要的海水养殖鱼类之一。随着石斑鱼集约化养殖规模的扩大,致使病害频发,造成巨大的经济损失。以天然中草药替代抗生素和化学合成药物取得良好的效果。当归作为使用频率最高8种中草药之一,有“十方九归”、“药王”之誉。当归多糖对陆生高等动物具有广泛的生物学效应,但对水产动物的影响报道较少。通过分析当归多糖结构与生物学活性的关系,阐明多糖的构效关系,为化学合成法合成高效的免疫多糖提供重要参考。 当归多糖为蛋白质多糖,其亚组份的免疫增强效果不及当归多糖,去除蛋白质后的免疫增强效果不及未除蛋白质的当归多糖。表明与蛋白质结合的当归多糖具有更强的免疫增强活性。当归多糖能提高点带石斑鱼溶菌酶活力,头肾白细胞吞噬、增殖和呼吸爆发活力,总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽硫转移酶活力。当归多糖能显著上调/下调TLR-22、MyD88、TNF-α、TRIF和IRF3基因的表达,说明当归多糖能激活TLR-22介导的2条信号通路,即TLR22→MyD88→TNF-α信号通路和TLR22→TRIF→ IRF3信号通路。喂食当归多糖能显著上调点带石斑鱼肝胰脏谷胱甘肽硫转移酶基因(Gst)、过氧化物酶基因(Prx)、硫氧还原蛋白基因(Trx)表达。利用iTRAQ技术从蛋白质组学角度证明,当归多糖能使吞噬体信号通路中的vATPase、Rab7蛋白质上调表达,F-actin、MR、gp91蛋白质下调表达;使T细胞受体信号通路和天然杀伤细胞介导的细胞毒性中的CaN蛋白质上调表达。总之,本项目初步阐明了当归多糖的构效关系和提高点带石斑鱼非特异性免疫和抗氧化能力的机理,并为化学合成法开发高效的免疫多糖提供重要参考。