[00123994]批量生物检材自动化检验系统的开发与应用

该成果系苏州市公安局物证鉴定所依托“二代接触性生物检材DNA 采集保存套装”、“改良Tecan EVO150-8 自动化核酸提取平台”、“批量生物检材DNA 裂解与载体去除装置”等三项前期科研成果,在生物检材DNA 提取纯化环节,对体系、程序进行研发与优化,建立起一种适用于Chelex-100 提取方法的标准化、自动化、高通量的快速DNA 检验系统。该成果于2016年五月确立为江苏省公安厅科研项目,2017年11月通过验收。 1.课题来源与背景:根据目前法医DNA检验中对检验时程的要求不断提高,检材数量成倍上升,检验成本激增的背景之下确立的。 2.技术原理及性能指标:通过把新型生物检材采集套装配合批量生物检材DNA 裂解与载体去除装置, 实现批量载体和Chelex-100 螯合树脂等PCR 抑制因素快速去除,显著提高DNA 检出率。调试优化EVO 150-8 自动化平台运行程序,使之适应批量生物检材DNA裂解与载体去除装置和Chelex-100 提取方法的实验条件,包括Chelex-100裂解液的抽提、分配与转移和后续PCR 体系的构建;Chelex-100 提取方法实验条件的优化,具体包括裂解体系的选择和实验温度的控制;除阳性、阴性对照之外,最多一次性处理184 个样本.对血迹、烟蒂、口香糖、精斑、组织、软骨等DNA 含量较高的检材,检验成功率大于95%;对于批量检材的检验,其模板DNA 回收率超过85%;184 份生物检材提取及PCR 构建过程40分钟完成。 3.技术的创新性与先进性:具有完全的自主知识产权,是一项创新性产品,对DNA检验的效率有着大幅提高,并且显著降低了检验成本.通过文献检索和专利查询,并未发现关于Chelex-100 结合自动化工作站核酸提取系统应用于法庭科学的相关研究报道,本项目的技术水平处于国内领先。 4.技术的成熟程度适用范围及安全性:该检验系统在苏州市公安局和太仓市公安局应用,通过对5000余份各类检材的检验,数据分析表明检验效率比以往提高50%,单个样本检验成本降低80%。 5.应用情况及存在的问题:该成果已在苏州市公安局物证鉴定所投入使用,计划向全市范围各物证鉴定室推广。 6.项目完成情况:该项目于2016年5月1日立项2017年11月10日通过验收。