[00125021]免疫层析检测数据的计算机分析与处理系统

“免疫层析检测数据的计算机分析与处理系统”项目是河北省科学院科技攻关项目，编号：08917，起止年限是2008～2009年。经过1年的努力工作，课题组现已完成了项目合同书所规定的各项内容。一、任务要求根据项目合同书的内容，研究任务是：完成胶体金制备工艺，对胶体金制备工艺进行了修改和完善；对胶体金层析试纸条的主要材料纤维素膜的特性进行分析比较，制定出相应的标准和规范，提交“图像半定量分析软件”一套。二、研究内容和结果根据合同要求，我们进行了以下工作：1. 分别用柠檬酸法和柠檬酸—鞣酸法进行胶体金颗粒的制备，根据结果对胶体金制备工艺进行了修改和完善。2. 对胶体金标记AFP抗体的条件进行优化，找到最佳的标记条件。3. 对标记好的AFP抗体进行配对实验，找到最佳的配对组合。4. 对多种试纸条用纤维素膜的特性进行了比较和分析。5. 制备了大量胶体金免疫层析试纸条，并对试纸条的几何尺寸（即长度、宽度）及测试线和控制线位置进行了规范和标准化。6. 对抗体的纯化方法进行了研究。7. 我们研制了一套“胶体金免疫层析试纸条半定量分析软件”。得到了以下结果：1. 柠檬酸法和柠檬酸—鞣酸法都可以制备到颗粒大小合适，颗粒形状均匀的胶体金，其中柠檬酸法使用试剂较少、方法简单，适合推广使用。2. 对胶体金标记AFP抗体的条件进行优化，发现标记的最佳pH为8.0～9.0。3. 对标记好的AFP抗体进行配对实验，找到最佳的配对组合为金2C7H11和膜3B2B2。4. 对多种试纸条用纤维素膜的特性进行了比较和分析，发现膜的结构、孔径和空隙率对膜的层析性能影响巨大，对膜的蛋白吸附量也有显著影响。5. 应用一种新的抗体纯化方法，即硫酸铵盐析结合疏水电荷诱导层析（HCIC）的方法，得到了纯度大于90%的抗体，完全适用于层析试纸条使用。6. 研制的“胶体金免疫层析试纸条半定量分析软件”具有定量准确、操作简单、运行稳定等特点，适用于研究领域与免疫学相关的各种科研院所、各类生物公司等。7. 软件介绍软件主要有3个功能模块，分别是图像编辑器、数据库管理和图像灰度值定量，其中图像灰度值定量是软件的主体，主要功能是对图像进行编辑、数据库管理及对图像的灰度值进行半定量。该软件具有平台先进、精巧灵活、稳定可靠等特点，适用于研究领域与免疫诊断学相关的各种科研院所、各类生物公司和各种医院及诊所等。三、课题创新点1. 对胶体金免疫层析试纸条的几何尺寸及测试线和控制线进行标准化。2. 对胶体金免疫层析试纸条的膜的选择和前处理进行标准化。3. 使用独立的分析软件对测定结果进行定性和半定量分析。四、资金来源及使用情况该项目得到了河北省科学院的大力支持，项目费用共计90万元，其中设备购置费用14万元，各种材料费用32万元，测试化验加工及燃料动力费用22万元，会议及合作交流费用10万元，专家咨询费用2万元，其他费用合计10万元。五、存在的问题半定量分析中标准的制定是一个关键问题，如何更好的制定一个通用的标准是一个亟待解决的问题。应用前景胶体金免疫层析试纸条应用领域很广，可分为临床应用与非临床应用两类，目前应用多以前者为主。1. 临床应用 已应用于临床的很多领域，由于目前它还是定性分析，故主要用以检测正常人体中不存在的生物活性物质（如传染病的抗原及抗体），以及正常情况下体液中含量很低而在某些疾病中升高的生物活性物质。随着技术的进展，对某些可确定诊断的、有正常上限值（cutoff）的生物活性物质也可进行检测。2. 非临床应用可用于食品检测、环境污染、生物污染、还可用于生物试剂的快速检测，兽医学及法医学等方面检测。同国外相比，目前国内这一领域的研究仍处于起步阶段，国内还没有国产材料制成的成型产品，而市售的产品均系进口国外散件国内组装或直接代销的国外产品。由于金免疫结合试验的产品市场巨大，在国内开展这一领域的研究，尽快研制出多品种、高质量的金标快速检测产品，不仅可避免国内资金的大量外流，并且对提高我国国民健康水平，将起到不容忽视的作用。