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1. 研制出一种具有良好适用性的,食用菌通用的TSM-1半合成液体发酵培养基,并基于通用TSM-1液体发酵培养基,设计并验证了一系列食用菌液体菌种生产新模式,可缩短食用菌菌丝的生长周期至96 h,与传统摇瓶发酵培养基相比缩短发酵时间大于48 h。发酵96 h后的生物量平均为1.870 g·100 mL-1±0.03,相当于基础TSM-1培养基的2.7倍,传统CM培养基的7.8倍,pH稳定且能提高发酵醪中0.380 mm>等效颗粒粒径>0.180 mm的食用菌菌丝球占总生物量的比例至48%。 2. 研制出一种具有良好适用性的,食用菌通用的TSM-S-1固体菌种培养基,并基于通用TSM-S-1固体菌种培养基,设计并验证了一系列食用菌固体菌种生产新模式,与传统的固体菌种培养基相比缩短培养时间5 d,降低污染率至0.5%以下,较之传统的固体菌种培养基减小污染率≥1.2%,提高食用菌菌种菌丝的萌发率至100%,以及萌发速度至≤33 h。 3.研制出1种微生物生长促进剂TSD-1,主要成分包括DA-6、精氨酸、牛磺酸、维生素B族等。其中DA-6,即己酸二乙氨基乙醇酯(胺鲜脂),是一种高效的非激素类植物生长物质。课题组创造性地将植物生长调节剂DA-6应用到食用菌液体摇瓶发酵和发酵罐发酵中,TSD-1微生物生长促进剂在液体摇瓶发酵状态下对食用菌菌丝具有明显的生长刺激作用,其使用范围在0.02-0.04%,和钙蛋白配合时应为0.03%,而且具有生长调节作用,促培养基中速效氮源成分的利用。 4.在传统发酵液生物量测定方法的基础上独创了用于评估发酵醪中菌丝球形态分布和均匀程度的定量方法-尼龙目筛过滤法,并为筛选最适发酵培养基独创性的选取了培养基中0.380 mm>等效颗粒粒径>0.180 mm的菌丝球在96-144 h时间段内所占总生物量的比例为评估发酵培养基生物学效能的新指标,和pH值,生物量,残糖等作为新的可测量指标参与最优培养基(或培养体系,或生长因子等等)的综合评比分析。 5.通过研究发酵所得的液体菌种以及固体培养所得的固体菌种,的物理形状和其中菌丝球或菌丝的生物学性状,课题组初步设计了两套液体发酵生产食用菌原种质量的评估系统,和固态食用菌原种质量的评估系统并分别进行了量化评比指标的研究,为液体菌种的质量评估和控制打下基础。 6.创立了“液体发酵-固体扩繁”食用菌菌种生产新模式,并通过实验确定了“液体发酵-固体扩繁”生产食用菌菌种的具体流程以及相关规范。生产模式规范共分为为一,二级摇瓶种子的制备,种子罐液体种子的制备,大罐液体种子的制备,固体种子的制备和培养5步。此种新模式应用于食用菌菌种制备,将液体菌种和固体菌种相结合,可缩短食用菌菌种的生产周期至40 d以内,较之耗时77d的传统固体菌种培养模式,新系统缩短培养时间≥12 d,降低污染率至0.5%以下,较之传统的固体菌种培养基减小污染率≥1.2%,提高食用菌菌种菌丝的萌发率至100%,食用菌菌种中菌丝萌发速度仅为33 h。