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本实用新型公开了一种工厂化食用菌无污染净化接种室,属食用菌工厂化培育配套设施,包括接种室本体,接种室本体由墙体(1)和天花板(2)构成,所述的接种室还包括传递系统与室内温控系统,传递系统安装在接种室内部空间中,室内温控系统至少由制冷系统(3)、空气净化系统(4)与消毒系统(5)组合而成,室内温控系统由管道(6)连通至传递系统附近,且管道(6)的一端接入室内温控系统,另一端上安装有层流罩(7),层流罩(7)置于传递系统的上方;本实用新型所提供的一种工厂化食用菌无污染净化接种室适于作为各种食用菌类的工厂化生产接种培育工艺中的配套设施,且接种成功率,接种成功率可达到99%以上,应用前景广阔,易于推广。