[00126811]长白山中华蜜蜂等DNA多态性-遗传标记及探针的研究

本项目以长白山区域等不同地方采样点收集的陈旧性中蜂标本(75％乙醇浸泡液)为研究对象，通过标准酚提取法微量提取（样本质量＜10mg）和高纯度纯化基因组DNA (OD260/OD280≥ 2.0)；基因组DNA通过RAPD-PCR和琼脂糖凝胶电泳分离和扩增了DNA，获得DNA多态性图谱；NTsys统计软件分析DNA多态性图谱获得遗传距离的树状结构，并获得聚类分析结果；DNaee I酶学制备成了分子标记的特异性DNA探针，DNA探针与基因组DNA进行Southern杂交，进一步验证了分子标记。研究结果提示：长白山中蜂按照RAPD分子标记多态性规律可能分为两个地方类群，700(bp)DNA片段可能作为长白山中蜂基因组所特有的DNA序列。长白山中蜂具有个体较大，耐寒性能较强，维持大群，采集力强，抗病能力强等优良性状而闻名于世，已被国家列为重点保护的蜜蜂品种，深受国内外养蜂界的青睐。该项目的研究有如下优点：长白山中蜂基因组RAPD分子多态性遗传标记，不仅能够反映不同地区中华蜜蜂之间的差异信息，而且可以进一步通过多态性的分析寻找出与其优良性状密切相关的基因序列，因此具有一定的推广前景，特别是为寻找与蜜蜂高产、抗病等性状连锁的DNA序列奠定了技术基础，为今后开展蜜蜂基因工程的研究和培育转基因蜜蜂新品种创造了必要条件，对我国养蜂业的发展起到了极大的推动作用，可产生巨大的经济效益、社会效益和生态效益。