[00127404]多聚化合物促进蛋白正确折叠和提高蛋白稳定性的作用及其机制研究

1)根据蛋白复性的基本原理并结合聚合物的空间特征,我们通过控制聚合物单体以及反应的链引发和终止,获得了三大类十余种多聚化合物,系统检验了这些化合物对蛋白复性的促进效果,研究证明丙烯酸与甲基丙烯酸共聚物具备良好的促蛋白复性功能。 2)由于蛋白药物开发过程除存在蛋白非可溶性表达的制约外,还面临所制备的可溶性蛋白往往稳定性较差、体内半衰期较短的局限,这给药物保存、临床用药都产生了很大的不便甚至发展瓶颈。本课题组在前期研究工作基础上,基于本自然基金项目,创新性提出了将促蛋白复性和修饰相结合的新理论和新方法,利用PEG修饰制剂和蛋白复性缓冲溶液的巧妙组合成功开发了蛋白同时复性和修饰的新工艺,并成功应用到溶菌酶和FGF家族蛋白中。另外,根据FGF功能蛋白与肝素有特异性结合的特征,开发了固相PEG聚合物修饰技术,该技术在很好的实现蛋白特异性性修饰的同时很好的保留了蛋白本身的生物学活性,显示出与现有液相修饰明显的优势。 3) 围绕 本项目研究,以第一或通讯作者发表SCI论文3篇,申请国家发明专利2项,获得授权1项。 发表的论文; （1）Chaohui Ye, Dariush Ilghari, Jianlou Niu, Bailin Liu, Zhifeng Huang （corresponding author）. A novel pH-sensitive polymer-assisted protein refolding.J of Biotechnology, 31;160（3-4）:169-75, 2012. （2）Zhifeng Huang, Chaohui Ye, Zhijun Liu, Xiaojie Wang, Lu Tang, Yan Wang, Hongxin Zhao, Junfeng Wang, Wenke Feng, Xiaokun Li .Solid-Phase N-Terminus PEGylation of Recombinant Human Fibroblast Growth Factor 2 on Heparin-Sepharose Column. Bioconjungation Chem, 8;23（4）:740-50, 2012. （3）Zhifeng Huang, Guanghui Zhu, Chuanchuan Sun, Jingui Zhang, Yi Zhang, Youting Zhang, Chaohui Ye, Xiaojie Wang, Dariush Ilghari, Xiaokun Li. A Novel Solid-Phase Site-Specific PEGylation Enhances the in Vitro and in Vivo Biostabilty of Recombinant Human Keratinocyte Growth FactoR1. PLoS one, 7（5）:e36423, 2012. 发明专利： （1）黄志锋,李校堃,王会岩,王晓杰,冯文科,陆美斐,倪春燕,孙传传,叶朝辉。人成纤维细胞生长因子-21的聚乙二醇化学修饰物及其制备方法, 授权专利号：ZL201010291928.1 （2）黄志锋,刘白玲,牛建楼,李校堃,叶朝辉。结构可控型丙烯酸类共聚物的合成及其促进蛋白体外复性应用,申请号：201210150048.1