[00132297]一种特异性纯化高分子尿激酶层析介质及制备方法和应用

尿激酶（Urokinase,UK）是人体肾脏产生的一种碱性蛋白酶,会因人体代谢而随尿液排出,因此尿液是生产尿激酶的最主要来源之一。尿激酶可直接促使无活性的纤溶酶原转变为有活性的纤溶酶,使组成血栓的纤维蛋白水解,临床上用于脑血栓形成、脑栓塞、周围动脉或静脉血栓症、肺栓塞、急性心肌梗死等。 尿激酶在体内合成时为一分子量为55KD的单链多肽酶原,称为单链尿激酶（sc-uPA）。在人体尿液中,尿胃蛋白酶可把尿激酶原切割为双链形式具有高生物活性的天然尿激酶分子,其分子量为54700D。天然尿激酶分子双链通过二硫键链接,称为双链尿激酶（tc-uPA）,也称为高分子尿激酶（HUK）。受到各种酶的切割作用,高分子尿激酶会进一步降解为分子量为31300D的低分子尿激酶（LUK）。在溶栓药物的应用中,虽然LUK具有一定的体外溶栓生物活性,但由于缺少N-端的两个重要模块（生长因子样模块G和Kringle模块K）,在体内的溶栓作用机制不明确,可能会引起溶血等严重副反应。 本发明专利针对高分子尿激酶的三维空间结构,发明了一种特异性纯化高分子尿激酶层析介质。该介质可特异性吸附高分子尿激酶但不吸附低分子尿激酶,实现HUK和LUK的高效纯化分离。高分子尿激酶特异性层析介质制备过程简单,反应条件温和,应用于HUK生产工艺中,HUK回收率达98%以上,产品用PAGE法检测为单一条带,HPLC检测高分子尿激酶含量为99.5%以上,生物活性达到20万单位/mg.pr以上。