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本发明公开了一种生产WF16616的发酵培养基,其包括1~10%的碳源、1~6%的有机氮源和0.1~1%的无机磷酸盐,其中所述的碳源包括甘露醇和玉米淀粉;所述的氮源为棉籽粉、干酵母和聚蛋白胨,或者为黄豆饼粉、干酵母和聚蛋白胨;百分比为相对于所述发酵培养基的重量百分比。本发明还提供了所述的发酵培养基在以Tolypocladium parasiticum No.16616为产生菌发酵生产WF16616中的用途,以及一种发酵生产WF16616的方法。本发明的发酵培养基能够显著提高WF16616的产量(效价达300~420mg/L),相对于现有技术(3.1mg/L)有非常明显的提高,还能降低杂质的含量。