[00132933]呋喃西林代谢标志物--氨基脲的快速样品前处理和夹心ELISA检测方法研究

呋喃类药物因具有抗球虫和抗菌作用在早期被广泛应用于家禽、家畜、水产等养殖的传染病预防与治疗,后期研究表明它在动物体内残留的代谢产物对人体具有一定的毒性。早在20世纪70年代初,WTO曾向各国提出建议,对各种动物性食品中抗生素残留提出标准。目前呋喃西林药物残留分析检测技术主要有：气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、免疫分析法。其中以HPLC和HPLC-MS方法检测其代谢物为主,该类方法具有高度的灵敏度和特异性,但设备昂贵,对实验人员也有较高的要求,样品基质背景复杂、前处理过程繁琐,需要耗费较多的时间、被测感分浓度较低、分析仪器的定性能力受到限制、仪器检测灵敏度不够。此外,这些对药物残留的及时监控是不适合的,其推广使用受到一定限制。 本项目的工作集中在开发出具有自主知识产权的抗原抗体原材料,建立一种免萃取的SEM前快速处理系统,建立基于夹心的ELISA呋喃西林代谢物（SEM）检测技术与产品,实现了呋喃类代谢物的高灵敏的快速检测。夹心ELISA方法比竞争ELISA方法具有更好的灵敏度、特异性、定量判定准,而且样本前处理比目前市场的竞争检测试剂盒更简单、检测速度更快,尤其适合于一次性大批量样本快速筛选。由于没有萃取有机溶剂的影响,该试剂盒检测的特异性更高、重现性更好,适用范围广,可用于动物组织（肌肉、肝脏）、蜂蜜、肠衣、牛奶以及水产品等样品中呋喃西林代谢物残留的检测。 从生产成本上看,本项目使用的小分子及实际均采用日常使用的化学试剂,如小分子采用biotin进行标记,氨基保护剂（Boc）2O,连接臂二胺分子（如1,2-bis（2-aminoethoxy）ethane2）,反应溶剂如DMF等均为常用试剂,而且检测过程无萃取步骤,检测成本降低,因此,本方案从成本上考虑也适合于开展后续商业化应用开发。 本项目拟研制的呋喃西林药物残留快速前处理及夹心酶联免疫检测试剂盒将会填补国际呋喃西林代谢物快速检测的酶联免疫分析法应用的不足,对酶联免疫分析法检测食品中小分子药物残留方法的发展将会起到极大的推动作用。运用本方法对水产品、畜禽中呋喃西林代谢物残留进行筛选,能在几小时内检测几十到上百个样品,且不需要复杂的仪器设备,样品预处理比现有方法更简单,检测成本低。该检测试剂盒在国内和国际上将有极高应用前景,检测回收率、灵敏度、特异性和稳定性等方面都大大优于现有的基于竞争法的检测试剂盒,使我国呋喃西林代谢物检测技术达到世界先进水平。综上所述,本项目的实施将在很大程度上降低呋喃西林等违禁药物检测的成本及复杂性,提高检测通量,能促进现场及大规模筛查的广泛开展,为食品安全监察领域提供强有力的工具,提高广大群众的生活质量。