[00133233]H1N1型流感病毒致小鼠免疫功能失调与中医药干预作用机理的研究

⑴任务来源：浙江省自然科学基金, 名称及其编号：H1N1型流感病毒致小鼠免疫功能失调与中医药干预作用机理的研究,Y206862 ⑵应用领域和技术原理：流行性感冒（流感）是对人类健康威胁最大和人类至今尚不能有效控制的世界性传染病之一。祖国医学对流感的治疗有着悠久的历史,不少方药临床运用确实行之有效,而且毒副作用小,药源丰富,价格低廉。防感颗粒系国家级名老中医宋康教授的经验方,有较好的防治流感的临床效果,主要应用于卫生行业医药领域。 ⑶性能指标（写明合同要求的主要性能指标和实际达到的性能指标）：本课题分体内、外两部分进行,体外部分采用血清药理学的实验方法,通过观测防感煎剂和H1N1型流感病毒之间在不同时间点作用于MDCK细胞所发生的细胞病变效应（CPE）以及MTT法定量检测存活细胞数量,分析在病毒感染细胞的过程中本药对甲型流感病毒抑制作用的可能机制;体内部分则建立H1N1型流感病毒感染小鼠模型,观察防感煎剂对感染小鼠死亡保护情况,动态检测肺指数及胸腺、脾脏指数,Real-time RTPCR定量测定感染鼠肺病毒含量以及用流式细胞仪、ELISA定量测定T细胞亚群和相关细胞因子,进一步研究本药体内对甲型流感病毒的抑制作用。 ⑷与国内外同类技术比较：由于流感病毒的抗原变异能力极强且相当频繁,使得疫苗效果不稳定,对易感人群的保护率不高;现有抗病毒药耐药性及严重毒副作用的产生限制了其在临床上的广泛应用;流感病毒吸附抑制剂、细胞-病毒膜融合抑制剂和反义核苷酸等还处于实验室研究阶段,因此至今尚缺乏理想的抗病毒药物,开发安全有效的抗流感病毒新药是当前医学界面临的重要课题。中医药治疗呼吸道流感病毒感染,不单纯着眼于直接的抗病毒作用,而是重视流感病毒-机体-中药三者的关系;不仅是以清除体内病原体为目的,而是通过改善机体状态,调动机体抗病力量。从长期临床经验看,中药治疗流感病毒临床效果显著,关键在复方,中药复方制剂是根据中医理论结合临床经验而组成的,体现中医辨证施治的原则,临床疗效肯定,有研究、开发的价值,值得深入研究。 ⑸成果的创造性、先进性： a、采用国际上先进的中药血清药理实验方法研究防感煎剂的体外抑制病毒效果及其机理。 b、从病情变化发展的角度入手,动态观测防感煎剂体内抑制病毒的效果。 c、体内外实验方法综合评价防感煎剂抑制病毒的疗效。 ⑹作用意义（直接经济效益和社会意义）：体外实验证实防感煎剂具有较好的直接抗病毒作用,体内部分进一步证明药物还可以通过减轻免疫器官的破坏,减轻肺部炎症损害,改善流感病毒感染时T细胞免疫功能抑制状况,促进抗病毒细胞因子IFN-γ、IL-2的分泌,调动机体特异性免疫因素,达到间接抑制病毒的作用。通过本实验研究,揭示了防感颗粒煎剂抑制甲型流感病毒的作用及机理,并为研究开发防治流感的中药新药以及药物的临床应用提供实验理论依据和药效学基础,将对我省的流感防治工作产生积极的推动作用,具有良好的社会效益和经济效益。