[00136864]梅花鹿免疫细胞活性因子药性研究及其基因克隆筛选

项目来源：吉林省科学技术厅课题基金（20010546）项目类别：应用基础研究所属领域：免疫学，分子生物学梅花鹿的药用价值举世公认，鹿茸、鹿胎、鹿鞭均为名贵药物该研究立足于发现与研究梅花鹿免疫细胞是否能产生生长因子类活性因子，探讨其免疫生物学活性与药用价值。利用成功建立的多种梅花鹿组织cDNA文库，通过PCR方法从中获取生长因子的基因并进性初步表达。采用梅花鹿脾细胞制备免疫细胞培养物，对其生物学活性进行初步研究，发现免疫细胞活性因子能促进多种免疫细胞及组织培养细胞增殖，促进小鼠手术创伤愈合，促进小鼠乙醇性胃粘膜损伤修复，促进小鼠病毒性心肌细胞损伤修复，可恢复环磷酰胺诱导的免疫抑制。利用吉林省双阳盛产梅花鹿的资源优势，从1999年起开始了吉林梅花鹿细胞cDNA文库的建立及测序工作，现已成功地建立了多种梅花鹿组织cDNA文库，并通过PCR方法从中获取了一段生长因子的基因。通过Genebank数据库检索，我们发现该基因与已知基因均不同，现正在申报基因专利。在未正式命名该因子前，我们暂定名新发现的该基因为梅花鹿生长因子基因，该因子为梅花鹿生长因子（SDGF）。我们并对该基因在大肠杆菌系统中进行初步表达。研究思路：1.梅花鹿免疫细胞活性因子的生物学活性与药性研究2.梅花鹿免疫细胞活性因子的分离提纯3.梅花鹿细胞cDNA文库的建立4.梅花鹿生长因子基因的钓取、测序、基因克隆的建立与表达创新点及特色：创新点之一：利用吉林省珍稀动物梅花鹿基因资源，成功获取梅花鹿生长因子药用活性基因，填补了梅花鹿药用基因信息研究空白。创新点之二：发现梅花鹿免疫细胞活性因子促损伤修复生物学活性，证实了其具有促机械性损伤、乙醇性胃粘膜损伤、病毒性心肌细胞损伤修复作用。创新点之三：研制的梅花鹿免疫细胞活性因子，为开发研制具有治疗外伤、胃粘膜损伤（溃疡）、病毒性心肌损伤（心肌炎）的动物源性药物提供实验基础。它是由梅花鹿被废弃的最大的免疫器官-脾脏制备，具有资源充足、成本低廉、制备工艺简单的特点。创新点之四：采用我们自己发现的梅花鹿生长因子基因（此基因正在申请基因专利），在基因专利的保护下，生产具有自主知识产权的基因工程产品。该项目将取得梅花鹿生长因子基因专利、生长因子基因工程产品专利及梅花鹿免疫细胞活性因子产品专利。以上几方面均属创新性研究。 该项目立足于生物类及基因工程类药物研制开发的应用基础研究。为研制治疗外伤、胃溃疡及病毒性心肌炎的梅花鹿源性药物提供实验基础。具有高科技的创新性及广阔的市场需求和应用前景。