[00137631]铁皮石斛药材及相关产品质量标准研究

铁皮石斛具有“滋阴清热、益胃生津”之功效,其滋阴养生效果为历代医家所推崇。伴随着人们养生保健意识的增强,铁皮石斛产品越来越受到青睐,2011年铁皮石斛产业年销售达二十多亿元。铁皮石斛野生资源几近枯竭,产品原料主要来自人工培育,市场上出现了不少其它石斛冒充铁皮石斛,甚至非石斛冒充铁皮石斛,生产铁皮石斛产品或作为药材及饮片销售获利。针对当时铁皮石斛行业缺乏可靠的、特征性强的质控方法而造成相关市场混乱局面,建立先进的铁皮石斛及相关产品质量检测方法势在必行。本研究在浙江省重大科技专项等的支持下,经过六年的不懈努力,开展了铁皮石斛药材及相关产品质量标准研究。该研究成果可用于铁皮石斛药材及相关产品生产、经营、使用及研究等方面,有利于控制铁皮石斛药材及相关产品质量,保障铁皮石斛产品的保健功能和安全性,提升企业整体竞争力,推进铁皮石斛产业持续健康发展。 1.铁皮石斛化学成分研究 ⑴系统的铁皮石斛化学成分分离及结构确证：采用多种色谱等技术,对铁皮石斛的化学成分进行了提取、分离和结构鉴定,首次从铁皮石斛乙酸乙酯和正丁醇萃取物中分离得到23个化合物,鉴定了其中21个化合物,其中有15个化合物为首次从该属植物中分离得到。 ⑵发现了区别铁皮石斛药用部位及非药用部位的特征性成分：采用HPLC法分析了铁皮石斛茎、叶、花、根4个不同药用部位的化学成分,发现了铁皮石斛药用部位（茎）特有,而非药用部位（叶、花、根）不含有的成分－柚皮素,该成分可作为铁皮石斛及制剂质量控制的成分。 2.铁皮石斛药材质量检测研究 ⑴创建了铁皮石斛HPLC指纹图谱：选择相似度大于0.80的20批不同来源的铁皮石斛,建立了铁皮石斛药材对照指纹图谱色谱图,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对不同厂家提供的铁皮石斛与混淆品18个,进行相似度评价,发现铁皮石斛混淆品相似度均小于0.65。利用该法可区别铁皮石斛与混淆品、药用部位与非药用部位的鉴别,并为铁皮石斛产品质量检测奠定了基础。 ⑵建立了铁皮石斛基因指纹图谱：收集国内外石斛野生种质资源鲜品15种、不同产地来源铁皮石斛栽培品和市场常见其它非铁皮石斛各30余批次。分别采用ISSR、RAPD及SCAR标记技术,建立基因指纹图谱,可用于区别铁皮石斛及不同品种石斛。 ⑶优化了现行药典铁皮石斛薄层鉴别方法：在确保鉴别质量前提下,将展开剂系统由4元优化成2元,且不含易制毒试剂,从而优化了薄层鉴别方法,提高检测效率和试验安全性,可作为铁皮石斛原料快速检测方法。 ⑷新增了铁皮石斛柚皮素含量测定方法：在2010版中国药典多糖及甘露糖含量测定基础上,增加特征指纹图谱中含量相对较高、且在铁皮石斛非药用部位中不含的柚皮素作为含量测定指标,能更可靠地进一步评价铁皮石斛品质。 3.铁皮石斛产品质量检测 ⑴创建了铁皮石斛相关产品HPLC特征图谱：选用目前浙江省内市场占有率最高的7大铁皮石斛保健食品生产厂商12个品种,分成4类进行研究,对不同铁皮枫斗制剂及其不同萃取部位进行了分析,建立了铁皮枫斗制剂特征图谱,并利用该评价体系对现有市售的共9个厂家15个品种90余批次铁皮枫斗制剂进行检测。发现了存在问题,及时与有关企业进行了沟通,保障了产品质量。 ⑵创建了铁皮石斛相关产品柚皮素含量测定方法：在采用铁皮石斛相关产品HPLC特征图谱鉴别原料真伪的基础上,选取铁皮石斛药用部位茎中存在而非药用部位叶、花、根中不存在的柚皮素作为含量测定指标,建立了检测方法,对控制铁皮石斛投药量具有重要意义。 ⑶形成了铁皮石斛相关产品质量控制平台：采用HPLC特征图谱与指标性成分含量测定相结合,系统地建立了铁皮石斛相关产品的质控方法。利用国家中医药重点实验室与省重中之重学科资源,组建铁皮石斛保健产品质量控制平台。《铁皮石斛药材及相关产品质量检测与评价》已申报中医药继续教育项目,可促进铁皮石斛质量标准的推广。 本研究创建并形成了具有实际应用价值的铁皮石斛快速检测方法和品质评价体系,其中铁皮石斛产品质控方法经浙江省食品药品检验所复核一致,并经中国食品药品检定研究院和中国保健食品审评专家鉴定,认为该技术可用于铁皮石斛从原料到最终产品的综合质量控制。目前已有省内主要生产铁皮石斛的企业应用该法作为企业标准。发表学术论文14篇,申报国家发明专利1项、国家保健食品1项。在完成了铁皮石斛药材及相关产品的质量标准研究工作的基础上,课题组后续在国家科技部十二五支撑计划课题资助下,开展铁皮石斛大宗中药材质量标准提高及其综合利用研究,对推动浙江省铁皮石斛产业的发展具有十分积极意义。