[00138177]枸杞多糖对肿瘤细胞的抑制及凋亡的应用研究

本试验通过体外培养肿瘤细胞,经不同剂量枸杞多糖（LBP）处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对肿瘤细胞周期和凋亡的影响,用RT-PCR技术检测肿瘤细胞凋亡相关基因β-catenin和Survivin mRNA的表达水平。探讨枸杞多糖诱导肿瘤细胞的凋亡作用及其作用机制。为临床上治疗恶性肿瘤提供理论基础,同时为临床上开发抗肿瘤药物提供参考。 在本实验中,我们培养肿瘤细胞,将其分为对照组和5不同质量浓度的枸杞多糖实验组。利用MTT染色在普通光镜下观察细胞凋亡形态学变化并观测枸杞多糖对肿瘤细胞的抑制率;通过流式细胞仪分析肿瘤细胞的凋亡率、细胞周期变化;DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测肿瘤细胞凋亡的DNA水平变化;激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）检测细胞内钙离子浓度变化;RT-PCR检测凋亡相关基因β-catenin和Survivin mRNA的表达水平。 该实验的结果表明：经枸杞多糖作用后的肿瘤细胞出现凋亡的形态学改变,各剂量LBP组的肿瘤细胞均表现生长抑制,且具有剂量依赖性,DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的梯形电泳条带。药物处理组的肿瘤细胞更多地被阻止于G2/M期,各剂量组均出现不同程度的凋亡变化。各剂量药物处理组的肿瘤细胞内的Ca2+浓度明显高于对照组（P＜0.01）。RT-PCR检测枸杞多糖能使肿瘤细胞凋亡相关基因β-catenin和Survivin mRNA的表达水平均明显降低（P＜0.01）。 从本实验的结果来看,枸杞多糖可明显抑制肿瘤细胞生长增殖,诱导细胞凋亡,并能改变该肿瘤细胞周期分布,阻止细胞周期于G2/M期;枸杞多糖能使肿瘤细胞凋亡相关基因β-catenin和Survivin mRNA的表达水平均明显降低。