[00138255]益气健脾法调节HIV/AIDS免疫功能的分子机制研究

本项目基于艾滋病主要侵犯机体免疫功能这一病理特点,在课题组在前期“十一五”科技重大专项HIV/AIDS肺脾气虚证证候生物学基础研究基础上,对HIV/AIDS肺脾气虚证差异mRNA及MicroRNA的对应关系进行了进一步分析,结合第一阶段根据差异基因本体功能筛选的凋亡相关基因进行整合,确定了13个凋亡相关基因,分别是FAM134B,PRDX2,PPT1,CD70,CFLAR,TNFSF10,IL1B,TNFAIP3,CXCL1,PTGS2,NFKBIA,G0S2,BCL2A1,之相对应5个microRNA与之相对应hsa-mir-182-3P、hsa-mir-155-3P、hsa-mir-183-3P、hsa-mir-132-5P、hsa-mir-222-5P,并以此为模板分别制作RT2 Profiler PCR Array mRNA、microRNA芯片进行检测,探索HIV/AIDS肺脾气虚证免疫功能损伤的分子机制;采用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群检测,运用多元线回归分析、关联规则等数据挖掘方法,分析HIV/AIDS T淋巴细胞亚群与免疫相关基因表达及MicroRNA的相关性;应用中药益艾康对HIV/AIDS肺脾气虚证进行药物干预,检测治疗前后凋亡相关mRNA及microRNA的表达变化,探索中医药调节HIV/AIDS免疫功能的作用机制。 研究结果显示：HIV/AIDS肺脾气虚证T细胞与凋亡相关基因相关性分析结果显示,G0S2与CD95+/CD8+、CD28+/CD4+相关性具有统计学意义,BCL2A1与T H/S相关性具有统计学意义。HIV/AIDS肺脾气虚证组T细胞与凋亡相关MicroRNA相关性分析结果显示,hsa-mir-155-3P、hsa-mir-132-5P均与CD25+/CD8+相关性具有统计学意义;hsa-mir-183-3P与CD38+/CD8+、CD25+/CD4+相关性具有统计学意义;hsa-mir-222-5P与CD3+CD4+、CD25+/CD8+相关性具有统计学意义。HIV/AIDS肺脾气虚证治疗前后凋亡相关基因及MicroRNA分析结果显示有统计学意义凋亡相关基因4个,其中表达量升高的有1个（PPT1）;表达量降低的有3个（TNFAIP3、NFKBIA、BCL2A1）。HIV/AIDS肺脾气虚证组治疗前后凋亡相关MicroRNA相比,差异无统计学意义。该项目通过对HIV/AIDS肺脾气虚证凋亡相关基因及MicroRNA研究显示中医药调节HIV/AIDS免疫功能的内在机制具有一定生物学基础,尤其在治疗前后具有统计学意义的凋亡相关基因的关联分析主要分布在NF-KB信号通路上,中医药可能通过NF-KB信号通路调控调节HIV/AIDS的免疫功能,其内在调控机制还有待于通过体内、体外研究进一步验证。